Tg(mpl:eGFP)smu4,动物试验

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基本信息

品系名称：Tg(mpl:eGFP)smu4

英文名称：Tg(mpl:eGFP)smu4

疾病名称：NA

相关基因：i

背景品系：AB

遗传类型：染色体显性遗传

繁殖方式：侧交

繁殖代数：第5代

研究用途：用于血小板生成，血小板相关疾病病理机制的研究以及药物评估筛选。

饲养环境：斑马鱼养殖系统，28.5℃

培育单位：南方医科大学

保种单位：华南理工大学医学院

资源鉴定：已通过实验动物模型鉴定与评价工作委员会鉴定

鉴定日期：2020-05-02 00:00:00

特征描述

1. Tg(mpl:eGFP)smu4转基因系斑马鱼的表达谱

mpl-GFP阳性(mpl:eGFP +)细胞（血小板及血小板前体细胞）在波长488的激发光照射下发出绿色荧光，可以在荧光显微镜下直接观察与计数。

mpl:eGFP+ 细胞与mpl的WISH（原位杂交染色）染色结果类似，约40hpf时从主动脉-性腺-中肾（AGM）和CHT区出现，随后在CHT和循环中迅速增加，从2dpf出现在血液循环中，从8dpf开始逐渐减少，最后在11dpf左右时荧光消失。（如图2所示）。

2. Tg(mpl:eGFP)smu4转基因系斑马鱼的组织特异性

免疫组化抗体染色实验显示，mpl:eGFP表达既不与髓样细胞（Lcp1+）重叠也不与红细胞（Hbae1+）重叠，但与少量gata1+红系前体细胞（gata1:DsRed+）重叠（图3）， 说明mpl:eGFP阳性细胞特异性标记gata1细胞衍生的血小板，不标记髓系细胞和红系细胞。

3. Tg(mpl:eGFP)smu4斑马鱼限定为血小板细胞的表型

比较mpl:eGFP和cd41:eGFP细胞群，mpl:eGFP阳性细胞群中的血小板标记基因cd42a，kif1b，lrrc32和nfe表达量更高，说明mpl:eGFP比cd41:eGFP更特异地标记了血小板（图4 A）。mpl:eGFP 主要（约90%）标记细胞质稀少且细胞核浓缩的血小板细胞和血小板前体细胞，而cd41:eGFP细胞却含有一小部分(30%)与HSPC对应的较大细胞（图4 B-D）。

4. mpl:eGFP阳性细胞为有功能的血小板细胞

Tg(mpl:eGFP)smu4斑马鱼的血管损伤后，循环中的mpl:eGFP+细胞可以到达伤口并发生凝结堵塞伤口（如图5所示）。

5. mpl:eGFP阳性细胞受血小板生成信号通路调控

在Tg(mpl:eGFP)smu4斑马鱼中过表达tpo的mRNA，血液中CHT造血区的mpl:eGFP+阳性细胞的表达会显著增加。在Tg(mpl:eGFP)smu4斑马鱼中导入注射用的重组人IL-11，mpl:eGFP+细胞的表达也显著增加（如图6所示）。

动物简介

营养成分

生物学特性

遗传信息

实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

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