欢迎您访问北检(北京)检测技术研究所!
试验专题 站点地图 400-635-0567

当前位置:首页 > 检测项目 > 科研实验室 > 动物试验

B6-<i>Tlr4<sup>tm1</sup></i>小鼠,动物试验

原创发布者:北检院    发布时间:2023-03-01     点击数:

获取试验方案?获取试验报价?获取试验周期?

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。

基本信息

品系名称:B6-Tlr4tm1小鼠

英文名称:B6-Tlr4tm1 mouse

疾病名称:传染性疾病、肾病、肿瘤、癫痫等

相关基因:Tlr4

背景品系:C57BL/6J

遗传类型:基因敲除

繁殖方式:HOM X HOM

繁殖代数:NA

研究用途:用于研究传染性疾病、肿瘤、炎症、移植排斥等。

饲养环境:屏障或隔离环境

培育单位:北京华阜康生物科技股份有限公司、中国医学科学院医学实验动物研究所

保种单位:中国医学科学院医学实验动物研究所

资源鉴定:

鉴定日期:暂无介绍

特征描述

人类的TLR蛋白属于I型跨膜蛋白,由胞外区、跨膜段和胞内区3部分组成 TLR胞外区是由(18~ 31)个富含亮氨酸的重复序列。胞内区含有大约200个氨基酸残基,由TLR同源结构域(Tollhomologydomain,TH)和分子羧基端长短不同的短尾肽组成。TLR家族成员在机体对不同病原微生物的免疫反应中均有重要作用。TLR 4是Toll样受体家族的成员之一,也是一种模式识别受体(patternrecognitionrece-tors,PRRs),能够识别微生物进化过程中的一些保守结构即病原相关分子模式(pathogen-associatedmolecularpatterns,PAMAs),如LPS。它属于I型跨膜受体蛋白;胞外区由富含亮氨酸的重复序列LRR(1eucine-richrepeats)组成,胞内区与IL- 1受体胞内区相似,称为TIR(TolI/IL- 1receptor)区。起初,TLR 2曾被认为是一种介导LPS诱导细胞激活的受体,Hirschfeld证实,苯提取后高纯度的LPS不能激活TLR 2转染的细胞,而粗制的却能激活,所以,最初的实验可能是粗制LPS中的其他活性成分经TLR 2激活细胞。此后,TLR 4在LPS信号途径中的作用逐渐开始受到重视。TLR 4可在多种细胞中表达,如内皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突细胞以及心肌细胞等。目前发现的TLR 4的配体除LPS外还包括紫杉醇、呼吸道合胞体病毒蛋白F(respiratorysyncytialvirusproteinF,RSF)、热休克蛋白60(HSP60),假单胞菌属LPS等。进一步研究发现,TLR 4不仅是LPS的主要受体,还能识别多种病原相关分子模式(pathogenassociatedmolecu-larpattern,PAMP)例如,细菌DNA中未甲基化的CpG基序和肽聚糖(PGs)、G-细菌的LPS、G+细菌的脂磷壁酸(LTA)、RNA病毒的dsRNA等,产生不同的效应。1.2 TLR 4的信号转导 TLR 4介导LPS胞内信号传递要涉及几种通路,最终都要激活NF-κB或丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-ativatedproteinkinase,MAPK)。LPS是G -菌细胞外壁的一种组成成分,LPS在进入机体后与血浆中的游离的LBP结合成复合物,在CD 14,MD 2的协助下,复合物与细胞膜上的跨膜蛋白受体TLR 4结合,后引发一系列的胞内信号转导,主要包括MyD 88通过C端的TLR区域与TLR 4胞内的TLR区域结合,作为接头蛋白招募的IRAK,IRAK再结合TRAF6活化转化生长因子β激酶1(TAK 1),TAK 1引发核因子激酶(NIK)活化,并激活核因子抑制蛋白(IKB)酶复合物形成活化的IKB激酶(IKK)复合体,其作用于IKB使之泛素化而降解,从而IKB和NF-κB解离,后者迁移到胞核内,通过NF-κB激活细胞因子基因转录,如IL- 1、IL- 6和IL-8,介导B 7家族成员表达活化,而通过抗原呈递细胞(APC)活化T淋巴细胞,激活获得性免疫系统。 目前已知TLR 4介导的信号转导包括MyD 88依赖性和非依赖性途径 MyD 88依赖性途径主要介导NF-κB活化、细胞因子的产生,而MyD 88非依赖性途径主要负责LPS诱导的IFN诱导性蛋白10(IFN-indueibleprotein 10)糖皮质激素终止反应基因16(glucocortcoid atten uated responsegene16,GARG- 16)、INF调节基因1(INF-regulatedgene 1,IRG- 1)表达和树突状细胞(DC)成熟【1】。Tlr4与肾脏脓毒症、肾脏感染、急性肾功能衰竭、肾间质纤维化、肾脏移植排斥等均有相关的作用【1】。此外有报道称TLR4参与肿瘤免疫逃逸除了外源性活化机制外,肿瘤微环境中的内源性配体同样可能发挥重要作用【2】。TLR4信号通路在动脉粥样硬化(AS)中的作用成为心血管领域中的一个热点【3】。Tlr4在组织受损和应激时被激活,加剧癫痫的发作【4】。

动物简介

Toll样受体4(TLR 4)在识别细菌多糖(lipopolysaccharide,LPS)及介导的炎症反应信号转导中起重要作用。

营养成分

饲料营养成分:水分≤10%;粗蛋白≥20%;粗脂肪≥4%;粗纤维≤5%;粗灰分≤8%;钙1.0-1.8%;磷0.6-1.2%

生物学特性

生长曲线:无寿命:1-2年解剖学:无繁殖学:近交繁殖自发异常:无生理生化指标:无

遗传信息

根据目标基因TLR4的蛋白保守区和基因组结构,exon3(aa86-835)为公共exon,跨过保守功能区:TIR, LRR_RI super family,。因此在这里形成移码突变,TLR4所有转录产物都发生移码突变,达到蛋白功能失活的目的。因此CRISPR设计靶点将设计在转录产物TLR4-001的exon3上(下图中的红色箭头所指位置);

根据剪切DNA的活性结果,选用活性较高的gRNA (TLR4-g4,靶点如下)进行显微注射小鼠受精卵构建基因敲除小鼠。 靶位点位置 : TLR4-g4: TCTAGAAAGCTTCCCTATTGG

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

B6-<i>Tlr4<sup>tm1</sup></i>小鼠流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(B6-<i>Tlr4<sup>tm1</sup></i>小鼠,动物试验)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

  • 服务保障 一对一品质服务
  • 定制方案 提供非标定制试验方案
  • 保密协议 签订保密协议,严格保护客户隐私
  • 全国取样/寄样 全国上门取样/寄样/现场试验