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pcr检测非洲猪瘟检测标准

原创发布者:北检院    发布时间:2025-05-16     点击数:

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信息概要

非洲猪瘟(ASF)PCR检测是通过分子生物学技术快速、精准检测非洲猪瘟病毒核酸的核心方法,适用于生猪养殖、屠宰加工、疫病防控及跨境贸易等场景的病毒筛查。第三方检测机构提供符合国家及国际标准的ASF检测服务,涵盖样本采集、核酸提取、PCR扩增及结果分析全流程,确保检测结果准确性、可追溯性。检测对早期疫情预警、阻断传播链、保障生猪产业安全及食品安全具有重要意义,尤其适用于活体动物、肉制品、饲料及环境样本的病毒监测。

检测项目

病毒DNA定性检测,病毒载量定量分析,特异性基因靶点(如B646L基因)检测,检测限(LOD)验证,交叉反应性测试,试剂盒灵敏度验证,检测特异性评估,内参基因(如β-actin)对照检测,样本抑制物排查,核酸提取效率验证,阳性对照品复核,阴性对照品验证,重复性测试,再现性分析,环境样本污染评估,引物探针匹配性验证,扩增曲线分析,熔解曲线判定,Ct值阈值设定,检测结果假阳性/假阴性率统计

检测范围

生猪全血样本,血清样本,脾脏组织,淋巴结组织,肝脏组织,骨髓样本,粪便样本,鼻拭子,环境拭子(养殖场地面/设备),饲料原料,肉制品(鲜肉/冻肉),加工副产品,运输车辆表面样本,屠宰场污水,泔水样本,冷冻保存样本,甲醛固定组织,高温处理样本,疫苗污染筛查,生物安全实验室环境监测

检测方法

实时荧光定量PCR(qPCR):基于荧光探针的靶基因实时监测技术,具备高敏感性和定量能力

常规PCR扩增:通过电泳分析扩增产物,用于初步筛查

数字PCR(dPCR):绝对定量检测方法,适用于极低病毒载量样本

多重PCR:同时检测多个病毒基因靶点以提高准确性

逆转录PCR(RT-PCR):针对病毒RNA的检测变体(需区分ASFV相关实验)

巢式PCR:通过两轮扩增提升检测灵敏度

等温扩增技术(如LAMP):快速筛查的辅助方法

微滴式PCR:高通量检测平台,适用于大批量样本

磁珠法核酸提取:标准化提取流程保证核酸质量

柱式核酸纯化:传统提取方法,兼容多种样本类型

紫外分光光度法:核酸浓度与纯度测定

琼脂糖凝胶电泳:扩增产物初步验证

测序验证(Sanger):阳性样本的基因序列确认

内源性对照检测:排除样本抑制物干扰

国际参考方法(如OIE推荐方法):符合国际动物卫生标准

检测仪器

实时荧光定量PCR仪,核酸提取工作站,微量分光光度计,高速冷冻离心机,生物安全柜,高压灭菌锅,超低温冰箱,微型离心机,涡旋振荡器,恒温金属浴,电泳仪,凝胶成像系统,超纯水制备系统,微量移液器(多通道),生物分子分析仪(如Agilent Bioanalyzer)

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

pcr检测非洲猪瘟检测标准流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(pcr检测非洲猪瘟检测标准)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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