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核酸检测样本保存检测标准

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-26     点击数:

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核酸检测样本保存与检测标准解析

一、检测样品 核酸检测的常见样本类型包括咽拭子、鼻咽拭子、痰液、血液(血清/血浆)以及环境样本(如物体表面拭子)。样本需在采集后立即置于专用保存管中,保存液通常含病毒灭活成分(如胍盐类试剂)。不同样本的保存温度要求不同:咽拭子等常规样本在2~8℃下可保存24小时,长期存储需置于-70℃以下;血液样本分离后需在-20℃保存,避免反复冻融。

二、检测项目 核酸检测的核心项目包括:

  1. 病毒核酸定性检测:判断样本中是否存在目标病毒核酸。
  2. 病毒载量定量分析:通过标准曲线计算病毒核酸拷贝数。
  3. 基因分型与突变检测:针对病毒特异性基因区域(如S蛋白编码基因)进行测序分析。
  4. 内标检测:验证样本采集、提取及扩增过程的有效性,避免假阴性。

三、检测方法 核酸检测主要采用实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),具体流程分为四步:

  1. 样本预处理:对含保存液的样本进行涡旋震荡混匀,56℃水浴灭活30分钟。
  2. 核酸提取:使用磁珠法或离心柱法提取RNA,严格遵循“分区操作”原则,防止交叉污染。
  3. 扩增检测:将提取的核酸与引物、探针、酶混合,在PCR仪中进行扩增,通过荧光信号判断结果。
  4. 质量控制:每批次实验需包含阴性对照、阳性对照及空白对照,Ct值>40判定为阴性。

四、检测仪器 核酸检测需配备专业仪器设备:

  • 核酸提取仪:全自动或半自动机型,通量需匹配实验室检测规模。
  • 实时荧光PCR仪:支持多通道荧光检测,如ABI 7500、Bio-Rad CFX96等。
  • 生物安全柜:达到二级生物安全标准,用于样本前处理。
  • 超低温冰箱:-70℃以下保存样本及试剂。
  • 高速离心机:用于样本分层及试剂混合。 所有仪器需定期校准并记录维护日志,确保检测结果准确性。

五、注意事项

  1. 样本运输需符合《病原微生物菌(毒)种运输管理规定》,使用三重包装系统。
  2. 实验室须通过ISO 15189认证,操作人员需持有PCR上岗证。
  3. 检测结果异常时,需重复检测并追溯样本保存条件及实验流程。

核酸检测的标准化操作是确保结果可靠的关键。随着技术的迭代,数字PCR、等温扩增等新方法正在逐步应用,但样本采集、保存与质控的基础要求仍需严格执行。


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实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

核酸检测样本保存检测标准流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(核酸检测样本保存检测标准)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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