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msi检测的方法检测标准

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-24     点击数:

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<h3>微卫星不稳定性(MSI)检测方法及标准解析</h3> 微卫星不稳定性(Microsatellite Instability, MSI)是肿瘤分子诊断中的重要指标,尤其在结直肠癌、子宫内膜癌等恶性肿瘤的临床分型、预后评估及免疫治疗指导中具有关键作用。本文将详细介绍MSI检测的标准化流程,涵盖样品类型、检测项目、方法原理及仪器设备。 <h3>一、检测样品类型</h3> MSI检测通常需要从患者体内获取以下两类生物样本:<br> 1. 肿瘤组织样本:通过手术或穿刺活检获取的新鲜或石蜡包埋(FFPE)组织;<br> 2. 正常对照样本:患者外周血或癌旁正常组织,用于排除遗传多态性干扰。 <h3>二、核心检测项目</h3> 依据国际通用标准,检测涵盖5个微卫星位点组合:<br> - 单核苷酸重复序列:BAT-25、BAT-26、NR-21、NR-24、MONO-27<br> - 双核苷酸重复序列:D2S123、D5S346、D17S250<br> 检测结果根据异常位点数量分为:<br> • MSI-H(高度不稳定):≥2个位点异常<br> • MSI-L(低度不稳定):1个位点异常<br> • MSS(稳定):无异常位点 <h3>三、标准检测方法</h3> 目前主流检测技术为荧光PCR-毛细管电泳法:<br> 1. DNA提取:采用磁珠法或酚-氯仿法从样本中提取高质量DNA;<br> 2. PCR扩增:使用多重荧光引物对目标位点进行特异性扩增;<br> 3. 电泳分析:通过毛细管电泳仪分离扩增产物,检测片段长度差异;<br> 4. 结果判读:比对肿瘤与正常样本的微卫星图谱,识别重复序列变异。 <h3>四、关键仪器设备</h3> 检测流程涉及的核心仪器包括:<br> • 核酸定量仪:NanoDrop或Qubit系统,用于DNA浓度测定<br> • 梯度PCR仪:ABI Veriti系列,实现精准温度控制扩增<br> • 遗传分析仪:ABI 3500系列,完成高分辨率毛细管电泳<br> • 数据分析软件:GeneMapper或Microsatellite Finder,自动生成检测报告 <h3>五、质量控制系统</h3> 实验过程需设置阳性对照(已知MSI-H样本)和阴性对照(无DNA空白),同时要求检测灵敏度达到5%(可检出占比5%的异常细胞群)。样本DNA质量需满足OD260/280比值1.8-2.0,浓度≥10 ng/μL。 通过标准化检测流程的实施,MSI检测可为临床提供可靠的分子分型依据。随着NGS技术的应用拓展,多基因Panel检测正在成为新的发展趋势,但荧光PCR法因其成本优势和标准化程度,仍是目前临床实验室的主流选择。
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msi检测的方法检测标准流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(msi检测的方法检测标准)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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