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双平行核酸检测检测标准

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-23     点击数:

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双平行核酸检测标准解析:样品、项目、方法与仪器

随着核酸检测技术的广泛应用,双平行检测模式因其高灵敏度和可靠性,成为临床诊断与公共卫生监测的重要方法。本文从检测样品、检测项目、检测方法及仪器设备等方面,解析双平行核酸检测的核心流程与技术要求。

一、检测样品

双平行核酸检测的主要样品类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、血液及环境样本。其中,呼吸道样本(如咽拭子)为新冠病毒、流感病毒等病原体检测的常用样品;血液样本多用于HIV、肝炎病毒等血液传播病原体的筛查;环境样本则用于公共场所或冷链物流中的病原体污染监测。所有样品需在采集后4小时内完成预处理,并储存于-80℃超低温环境以确保核酸稳定性。

二、检测项目

双平行检测的核心项目为病原体核酸定性/定量分析,具体涵盖:

  1. 病毒检测:如新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、甲型/乙型流感病毒、HIV病毒等。
  2. 细菌检测:如结核分枝杆菌、肺炎链球菌等耐药性菌株的核酸筛查。
  3. 突变位点分析:针对病毒基因组的特异性突变(如新冠病毒S蛋白突变)进行序列比对。 每项检测需同步进行双试剂、双通道或双实验室的平行实验,以降低假阴性或假阳性风险。

三、检测方法

双平行核酸检测采用实时荧光定量PCR(qPCR)与数字PCR(dPCR)相结合的标准化流程:

  1. 核酸提取:使用磁珠法或离心柱法从样品中提取目标核酸,并通过紫外分光光度计检测纯度(OD260/OD280比值需介于1.8-2.0)。
  2. qPCR初筛:采用双探针设计,分别靶向病原体的保守基因与特异性基因,通过Ct值判定核酸载量。
  3. dPCR复核:对qPCR结果存疑的样本,通过微滴式数字PCR进行绝对定量,提升低浓度核酸的检测精度。 双方法结果一致性≥95%时,方可出具最终报告。

四、检测仪器

双平行检测需依托高精度仪器设备,核心设备包括:

  1. 核酸提取仪:如Thermo Fisher KingFisher Flex(磁珠法)或Qiagen QIAcube(离心柱法),支持全自动核酸纯化。
  2. 荧光定量PCR仪:Roche LightCycler 480或Bio-Rad CFX96,支持多通道荧光信号采集。
  3. 数字PCR系统:Bio-Rad QX200或Thermo Fisher QuantStudio,用于核酸绝对定量分析。
  4. 测序仪(可选):Illumina MiSeq或Oxford Nanopore MinION,用于突变位点的全基因组验证。

结语 双平行核酸检测通过多环节质控与结果交叉验证,显著提升了检测结果的准确性,为疾病诊断、疫情溯源及药物研发提供了可靠的技术支撑。未来,随着微流控芯片与人工智能判读技术的融合,检测效率与自动化水平有望进一步突破。


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实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

双平行核酸检测检测标准流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(双平行核酸检测检测标准)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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