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核算检测阳性判断检测标准

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-23     点击数:

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核酸检测阳性判断标准解析

核酸检测作为病原体筛查的核心技术,在疾病防控中发挥着重要作用。本文从检测全流程的技术规范角度,系统阐述阳性结果的判定依据及操作要点。

一、检测样品类型

呼吸道样本是新冠病毒检测的主要对象,包含三种有效采集方式:

  1. 咽拭子:使用医用棉签在双侧扁桃体及咽后壁反复擦拭3-5次
  2. 鼻拭子:将专用采样拭子深入鼻腔至鼻咽部停留15秒后旋转取出
  3. 深咳痰液:采集患者用力咳嗽后产生的下呼吸道分泌物

样本需在2小时内转移至含病毒保存液的EP管,冷藏运输时维持4℃环境,冷冻保存需达到-70℃超低温条件。

二、核心检测项目

检测聚焦新型冠状病毒特异性基因片段:

  • ORF1ab基因:病毒复制关键功能区段
  • N基因:核衣壳蛋白编码基因
  • E基因:包膜蛋白编码基因(部分试剂盒包含)

阳性判定需至少两个靶标同时检出,单靶标阳性需启动复核程序。

三、标准检测流程

采用实时荧光定量PCR技术,操作分四个阶段:

  1. 核酸提取:磁珠法提取体系处理样本,获得纯化RNA
  2. 逆转录:42℃环境下进行RNA向cDNA的转化
  3. 扩增程序:经过预变性(95℃ 3分钟)、45个循环的变性(95℃ 15秒)-退火延伸(60℃ 30秒)
  4. 荧光采集:每个循环结束后收集荧光信号

四、关键检测设备

实验室配置三类核心仪器:

  • 全自动核酸提取仪:如西安天隆NP968-C型,实现批量样本处理
  • 荧光定量PCR系统:ABI 7500等型号,具备多通道检测能力
  • 生物安全柜:Class II A2型,保障操作人员防护

五、结果判读规范

阳性判定需同时满足:

  1. 扩增曲线呈现典型"S"型上升
  2. Ct值≤40(经复测确认)
  3. 内标系统显示正常扩增
  4. 阴性对照无交叉污染
  5. 阳性对照符合预期Ct值范围

临界结果(Ct值37-40)需采用原试剂复检或更换检测系统验证。

核酸检测流程示意图

结语 规范的检测流程是确保结果准确性的根本。实验室需建立完善的质量控制体系,严格执行生物安全规程,通过人员定期培训、设备校准维护、试剂性能验证等多维度保障,为疫情防控提供可靠的技术支撑。


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测试流程

核算检测阳性判断检测标准流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(核算检测阳性判断检测标准)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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