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非洲猪瘟检测阳性检测标准

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-22     点击数:

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非洲猪瘟阳性检测标准及操作流程

非洲猪瘟(African Swine Fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种高度接触性传染病,对生猪养殖业危害极大。为确保疫情早发现、早处置,需严格按照国家标准进行实验室检测。以下是非洲猪瘟阳性检测的关键流程与要求。

一、检测样品类型

  1. 病料样品:包括病死猪的脾脏、淋巴结、肾脏、血液等组织或体液。
  2. 环境样品:养殖场、屠宰场、运输车辆等场所的拭子样本(如地面、栏舍表面)。
  3. 饲料及废弃物:疑似受污染的饲料、泔水等。

样品采集后需立即低温保存(2–8℃),并于24小时内送至实验室;若需长期保存,应置于-70℃以下环境。

二、检测项目

非洲猪瘟检测主要包括以下两类项目:

  1. 病原学检测:直接检测病毒核酸或抗原,适用于急性感染期样品。
  2. 血清学检测:检测感染猪体内特异性抗体,适用于慢性感染或康复期监测。

三、检测方法

  1. 荧光定量PCR(qPCR)

    • 原理:通过扩增病毒特异性基因片段(如P72、B646L基因)进行定性或定量分析。
    • 特点:灵敏度高、特异性强,可在4小时内完成检测。
  2. 酶联免疫吸附试验(ELISA)

    • 原理:利用抗原-抗体反应检测血清中的ASFV抗体。
    • 特点:适用于大规模筛查,需结合病原学检测综合判断。
  3. 间接免疫荧光试验(IFA)

    • 原理:通过荧光标记抗体与病毒抗原结合,观察特异性荧光信号。
    • 特点:常用于实验室确诊,需专业操作人员。

四、检测仪器与试剂

  1. 核心仪器

    • 荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Bio-Rad CFX96)
    • 高速离心机(转速≥12,000 rpm)
    • 生物安全柜(二级以上)
    • 酶标仪(用于ELISA检测)
  2. 主要试剂

    • ASFV荧光PCR检测试剂盒(需通过国家认证)
    • ASFV抗体ELISA检测试剂盒
    • 核酸提取试剂(如磁珠法提取试剂)

五、结果判定标准

  1. 阳性判定

    • 病原学检测:qPCR检测Ct值≤38,且扩增曲线呈典型S型。
    • 血清学检测:ELISA样本OD值≥临界值(Cut-off值),或IFA显示特异性荧光信号。
  2. 阴性判定

    • qPCR无扩增曲线或Ct值>38,且阴性对照正常。
    • ELISA样本OD值<临界值,且阳性对照符合要求。

六、注意事项

  1. 实验室需符合生物安全二级(BSL-2)标准,防止病毒扩散。
  2. 检测人员需穿戴防护装备,实验废弃物需高温高压灭菌处理。
  3. 阳性样品需立即上报当地动物疫病防控机构,并启动疫情应急预案。

通过规范化的检测流程和严格的判定标准,可有效提升非洲猪瘟的早期预警能力,为防控工作提供科学依据,最大限度减少养殖业损失。


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实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

非洲猪瘟检测阳性检测标准流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(非洲猪瘟检测阳性检测标准)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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