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分子检测技术标准与应用指南

一、检测样品

分子检测技术可应用于多种生物样本的检测，主要包括：

1. 临床样本：血液、唾液、尿液、组织切片等；
2. 微生物样本：细菌、病毒、真菌等病原体；
3. 环境样本：水体、土壤、空气等环境介质中的微生物或遗传物质；
4. 动植物样本：植物叶片、动物组织、细胞培养物等。 所有样品需符合无菌采集、低温保存（-20℃或-80℃）及规范运输标准，避免核酸降解。

二、检测项目

分子检测的核心项目包括：

1. 核酸提取与纯化：DNA/RNA的分离及浓度测定；
2. 靶标基因扩增：通过PCR、qPCR等技术检测特定基因序列；
3. 基因分型与突变分析：SNP检测、基因插入/缺失分析；
4. 病原体鉴定：病毒载量检测（如HIV、HPV）、耐药基因筛查；
5. 高通量测序：全基因组测序（WGS）、宏基因组分析（Metagenomics）。

三、检测方法

1. 核酸提取

   • 磁珠法：使用磁珠吸附核酸，适用于自动化高通量提取。
   • 离心柱法：通过硅胶膜结合核酸，适合小样本操作。
   • 标准依据：ISO 17822（临床样本核酸提取规范）。

2. PCR扩增

   • 常规PCR：用于基因片段扩增及电泳验证；
   • 实时荧光定量PCR（qPCR）：定量检测靶标基因表达量；
   • 数字PCR（dPCR）：绝对定量低丰度核酸。
   • 标准依据：CLSI MM03-A指南。

3. 测序分析

   • Sanger测序：单基因靶向测序；
   • 二代测序（NGS）：全基因组或靶向Panel测序；
   • 标准依据：ISO 20395（测序质量控制要求）。

四、检测仪器

1. 核酸提取设备：

   • 全自动核酸提取仪（如Qiagen QIAcube、Thermo KingFisher）；
   • 分光光度计（Nanodrop）或荧光计（Qubit）用于核酸定量。

2. 扩增设备：

   • 普通PCR仪（Bio-Rad T100）；
   • 实时荧光定量PCR仪（ABI 7500、Roche LightCycler 480）。

3. 测序设备：

   • 毛细管电泳仪（ABI 3500系列）；
   • 高通量测序仪（Illumina NovaSeq、Thermo Ion GeneStudio）。

4. 辅助设备：

   • 超低温冰箱（样本保存）；
   • 生物安全柜（样本预处理）；
   • 数据分析软件（CLC Genomics Workbench、Geneious）。

五、质量控制要求

1. 内参基因：每个检测批次需加入阳性对照与阴性对照；
2. 重复性验证：关键步骤需重复3次以上；
3. 数据阈值：qPCR的Ct值需符合仪器说明书要求；
4. 报告规范：结果需包含检测限（LoD）、置信区间及方法局限性说明。

通过上述标准化流程，分子检测技术可为疾病诊断、环境监测及科研探索提供高精度、高灵敏度的技术支持。

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实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

5.如果对于（分子检测技术标准参考）还有什么疑问，可以咨询我们的工程师为您一一解答。