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γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒(GPNA底物法)检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-10     点击数:

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γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)测定试剂盒(GPNA底物法)检测说明

导语 γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)是临床诊断肝胆疾病的重要指标之一。本文基于GPNA底物法,详细说明γ-GT活性测定的实验流程及相关信息,适用于医学检验、科研及健康管理领域。

一、检测样品

本方法适用于人血清或血浆样本的检测。样本采集后需在2小时内离心分离(3000 rpm,10分钟),避免溶血或脂血干扰。分离后的样本在2~8℃条件下可保存48小时,长期保存需置于-20℃以下。

二、检测项目

检测项目为γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)活性测定,通过检测酶催化底物反应的速率,间接反映样本中γ-GT的活性水平。该指标对肝胆系统疾病(如胆汁淤积、肝炎、肝硬化)及酒精性肝损伤的早期筛查和疗效监测具有重要意义。

三、检测方法(GPNA底物法)

  1. 方法原理 以γ-谷氨酰对硝基苯胺(GPNA)为底物,在γ-GT的催化作用下,底物中的γ-谷氨酰基转移至受体甘氨酰甘氨酸(Gly-Gly),生成对硝基苯胺(PNA)。PNA在405 nm波长处吸光度升高速率与γ-GT活性成正比,通过动力学法计算酶活性单位。

  2. 反应体系

  • 试剂组成:含GPNA底物、Gly-Gly受体及缓冲液(pH 8.2~8.5)。
  • 反应条件:37℃恒温条件下,检测主波长405 nm,副波长600 nm(用于消除脂血干扰)。

四、检测仪器

  1. 适用设备
  • 全自动生化分析仪(如日立7180、罗氏Cobas系列)。
  • 半自动生化分析仪(需配合恒温比色装置)。
  1. 仪器参数设置
  • 温度:37℃
  • 波长:主波长405 nm,副波长600 nm
  • 读数时间:反应启动后60秒开始,连续监测180秒。
  1. 校准与质控
  • 校准品:使用配套γ-GT标准品建立标准曲线。
  • 质控品:每日检测需包含高、低两个水平的质控样本,偏差需<10%。

五、注意事项

  1. 试剂需避光保存(2~8℃),复溶后试剂在室温下稳定8小时。
  2. 样本中胆红素>342 μmol/L或甘油三酯>8.5 mmol/L时需稀释后复测。
  3. 避免试剂与金属离子接触,以防干扰反应。

结语 GPNA底物法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优势,可满足临床对γ-GT活性测定的精准需求。通过标准化操作及仪器配合,能够为肝胆疾病的诊断与治疗提供可靠依据。

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒(GPNA底物法)检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒(GPNA底物法)检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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