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唾液蛋白酶检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-09     点击数:

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唾液蛋白酶检测:方法与应用

检测样品 唾液蛋白酶检测的主要样品为人体唾液。采样时需使用无菌拭子或专用采集管,确保样本不受污染。受检者需在采样前避免饮食、吸烟或口腔清洁至少30分钟,以保证唾液成分的稳定性。采集后的样本需立即冷藏(2~8℃)或在-20℃条件下冷冻保存,避免蛋白酶活性降解。

检测项目 本检测的核心目标为定量分析唾液中的蛋白酶活性,具体包括以下内容:

  1. 蛋白酶总活性测定:评估唾液中所有蛋白酶的总体催化能力。
  2. 特异性蛋白酶分析:针对特定蛋白酶(如胰蛋白酶样酶、组织蛋白酶等)的活性检测。
  3. 酶动力学参数:包括最适反应温度、pH值及米氏常数(Km)等。

检测方法 检测采用分光光度法,基于蛋白酶对底物的水解作用。具体步骤如下:

  1. 样本预处理:将唾液样本离心(3000 rpm,10分钟),取上清液作为待测液。
  2. 底物反应:将待测液与酪蛋白或特异性合成底物(如BAPNA)混合,在37℃恒温条件下孵育。
  3. 终止反应:加入三氯乙酸(TCA)终止酶促反应,沉淀未水解的蛋白质。
  4. 吸光度测定:使用分光光度计在280 nm(酪蛋白法)或410 nm(BAPNA法)波长下检测水解产物的吸光度值,通过标准曲线计算蛋白酶活性单位(U/mL)。

检测仪器

  1. 分光光度计:用于测定反应产物的吸光度,推荐型号如Thermo Scientific NanoDrop系列。
  2. 离心机:用于唾液样本的预处理,需具备3000 rpm以上转速。
  3. 恒温水浴锅:维持酶促反应的最适温度(37℃±0.5℃)。
  4. 微量移液器:确保试剂与样本的精准加样(误差范围≤2%)。

应用场景 唾液蛋白酶检测在医学诊断与科研领域具有重要价值。例如,口腔炎症性疾病(如牙周炎)患者的蛋白酶活性常显著升高;此外,该指标还可用于评估消化系统功能及药物代谢研究。因其无创、便捷的特点,唾液检测正逐步成为临床筛查的理想选择。

通过标准化操作与高灵敏度仪器的结合,唾液蛋白酶检测可为疾病机制研究及个性化医疗提供可靠数据支持。

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

唾液蛋白酶检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(唾液蛋白酶检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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