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流式细胞术检测细胞因子的实验方案

检测样品

本研究选取临床采集的外周血样本作为主要检测对象，所有样本均采用EDTA抗凝管收集，经密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞（PBMC）。实验组与对照组样本均在生物安全柜中完成预处理，保存于-80℃超低温冰箱直至检测。

检测项目

本次检测聚焦6种关键性细胞因子：

1. 促炎因子：IL-2、IL-6、TNF-α
2. 抗炎因子：IL-4、IL-10
3. 趋化因子：IFN-γ 检测涵盖细胞因子的基础分泌水平及刺激诱导后的表达变化，为评估机体免疫状态提供量化依据。

检测方法

采用流式细胞微球阵列技术（CBA），实验流程包含三个核心阶段： 样本活化处理：加入PMA/离子霉素混合刺激剂，37℃培养箱中活化6小时，使用蛋白转运抑制剂阻断细胞因子分泌。 抗体标记：将荧光标记的捕获微球与待检样本共孵育，特异性结合目标细胞因子后，加入PE标记的检测抗体形成"三明治"复合物。 信号检测：通过标准曲线定量分析，所有操作严格遵循避光、低温条件，确保荧光信号稳定性。

检测仪器

主要设备配置如下：

• 流式细胞仪：BD FACSCanto II（配备405nm、488nm、640nm三激光系统）
• 数据分析系统：FlowJo v10.8专业分析软件
• 辅助设备：Eppendorf 5810R高速离心机、Thermo Scientific CO2培养箱 仪器使用前均通过BD CST质控微球校准，确保荧光通道灵敏度达到＜100 MESF的检测标准。

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实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

5.如果对于（流式检测细胞因子检测）还有什么疑问，可以咨询我们的工程师为您一一解答。