氧化应激动物模型检测

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氧化应激动物模型检测方法与分析

检测样品

实验选用健康成年Sprague-Dawley（SD）大鼠作为研究对象，通过腹腔注射**叔丁基过氧化氢（t-BHP）**建立急性氧化应激模型。实验组与对照组各10只，实验组注射剂量为10 mg/kg体重的t-BHP，对照组注射等体积生理盐水。实验结束后，采集大鼠血清、肝脏组织及脑组织样本，用于后续检测分析。

检测项目

检测指标主要包括：

1. 氧化损伤标志物：丙二醛（MDA）、蛋白质羰基化水平（PC）。
2. 抗氧化酶活性：超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）。
3. 活性氧（ROS）水平：通过细胞或组织内ROS荧光探针标记进行定量。
4. DNA氧化损伤：8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量。

检测方法

1. MDA检测：采用硫代巴比妥酸（TBA）比色法。样本与TBA试剂在酸性条件下加热反应，生成红色产物，通过分光光度计在532 nm波长处测定吸光度，计算MDA浓度。
2. SOD、GSH-Px、CAT活性测定：使用商品化试剂盒（如南京建成生物工程研究所生产），通过酶促反应动力学法检测。例如，SOD活性通过抑制邻苯三酚自氧化速率计算，GSH-Px活性基于谷胱甘肽氧化还原反应测定。
3. ROS检测：组织样本经DCFH-DA荧光探针孵育后，通过流式细胞仪或荧光酶标仪（激发波长488 nm，发射波长525 nm）检测荧光强度。
4. 8-OHdG定量：采用酶联免疫吸附法（ELISA），使用特异性单克隆抗体包被微孔板，通过标准曲线计算样本中8-OHdG含量。

检测仪器

1. 分光光度计：UV-1800型紫外可见分光光度计（日本岛津公司），用于MDA、SOD等吸光度测定。
2. 酶标仪：Synergy HTX多功能酶标仪（美国BioTek公司），适用于ELISA及荧光信号检测。
3. 流式细胞仪：BD FACSCanto II（美国BD公司），用于细胞或组织内ROS水平的精确分析。
4. 高速低温离心机：Centrifuge 5424R（德国Eppendorf公司），用于样本前处理。
5. 组织匀浆器：TissueLyser LT（德国Qiagen公司），用于肝脏及脑组织破碎。

总结

通过上述检测方法及仪器，可全面评估氧化应激动物模型中氧化损伤程度与抗氧化防御系统的变化。此类研究为揭示氧化应激相关疾病的分子机制及药物开发提供了重要实验依据。

实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

5.如果对于（氧化应激动物模型检测）还有什么疑问，可以咨询我们的工程师为您一一解答。