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细胞代谢组检测技术与应用分析

检测样品

本研究选取了哺乳动物细胞系（HEK293、HepG2）及原代小鼠肝细胞作为检测样本。所有样品均通过无菌培养技术处理，培养条件为37℃、5% CO₂环境，培养基为含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基。样品在收集后立即进行液氮速冻，并于-80℃超低温冰箱中保存，运输过程使用干冰维持低温环境，确保代谢物稳定性。

检测项目

本次代谢组检测涵盖氨基酸、糖类、有机酸、核苷酸、脂质及次级代谢产物等六大类目标物，总计分析超过500种代谢物。重点检测项目包括：

• 能量代谢相关物质（如ATP、NADH、乳酸）；
• 氧化应激标志物（谷胱甘肽、丙二醛）；
• 信号转导分子（cAMP、IP3）；
• 细胞增殖与凋亡关联代谢物（精胺、亚精胺、鞘氨醇）。

检测方法

采用**液相色谱-质谱联用技术（LC-MS/MS）**进行代谢组学分析，具体流程如下：

1. 样品前处理：细胞裂解后使用80%甲醇水溶液提取代谢物，离心去除蛋白沉淀，上清液经真空浓缩后复溶；
2. 色谱分离：选用C18反相色谱柱（2.1×100 mm, 1.7 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液和乙腈，梯度洗脱时长20分钟；
3. 质谱检测：采用电喷雾电离（ESI）源，正负离子模式切换扫描，质量扫描范围m/z 50-1000；
4. 数据分析：通过Compound Discoverer 3.1软件进行峰提取、代谢物鉴定及通路富集分析。

检测仪器

实验主要依赖以下高精度仪器完成：

• 超高效液相色谱仪：Waters ACQUITY UPLC H-Class系统，配备自动进样器和柱温箱；
• 高分辨质谱仪：Thermo Scientific Q Exactive HF-X Hybrid Quadrupole-Orbitrap，质量精度<3 ppm；
• 辅助设备：Eppendorf Centrifuge 5430R高速冷冻离心机、Labconco FreeZone真空浓缩仪。

结语

细胞代谢组检测能够系统性解析生理或病理状态下的代谢网络变化，为疾病机制研究、药物靶点筛选及精准医疗提供关键数据支持。本研究通过标准化的检测流程与先进仪器平台，实现了对细胞代谢状态的全面表征，后续将进一步结合多组学数据开展深入分析。

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实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

5.如果对于（细胞代谢组检测）还有什么疑问，可以咨询我们的工程师为您一一解答。