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细胞增殖检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-08     点击数:

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细胞增殖检测:原理、方法与实验流程

检测样品

细胞增殖检测的样品主要包括体外培养的细胞系、原代细胞、药物处理后的细胞样本以及基因编辑后的细胞模型。常见的样品类型涵盖肿瘤细胞(如HeLa、A549)、干细胞、免疫细胞(如T细胞)以及经特定化合物或生物因子刺激后的细胞群体。样品需满足无菌、活性良好且浓度适宜(通常为1×10^4至1×10^5 cells/mL)的要求。

检测项目

细胞增殖检测的核心目标是量化细胞在特定条件下的生长速率和分裂能力。主要检测项目包括:

  1. 细胞活力分析:评估细胞存活率与代谢活性;
  2. 增殖曲线绘制:通过连续监测细胞数量变化,反映增殖动力学特征;
  3. 细胞周期分布:分析细胞处于G1、S、G2/M期的比例;
  4. 克隆形成能力:测定单个细胞形成细胞集落的潜力。

检测方法

目前主流的细胞增殖检测方法包括以下四种: 1. CCK-8法 基于水溶性四唑盐(WST-8)的还原反应,通过检测450 nm波长处的吸光度值,间接反映活细胞数量。该方法操作简便,适用于高通量筛选。

2. MTT法 利用MTT试剂被线粒体脱氢酶还原为紫色结晶物的特性,通过溶解结晶后测量570 nm吸光度值,评估细胞增殖状态。需注意MTT对细胞具有毒性,需严格控制孵育时间。

3. BrdU标记法 通过掺入胸腺嘧啶类似物BrdU,结合特异性抗体与荧光标记,定量检测DNA合成活跃的细胞比例。此方法适用于精准分析S期细胞占比。

4. 流式细胞术 采用碘化丙啶(PI)或DAPI染色,结合流式细胞仪分析细胞周期分布,或通过CFSE染料追踪细胞分裂代数,实现动态增殖监测。

检测仪器

细胞增殖检测依赖以下关键仪器设备:

  1. 酶标仪(如BioTek Synergy H1):用于读取CCK-8、MTT等试剂的吸光度数据;
  2. 流式细胞仪(如BD FACSCanto II):完成细胞周期分析或CFSE标记检测;
  3. 倒置显微镜(如Olympus IX73):观察细胞形态与克隆形成情况;
  4. CO2培养箱(如Thermo Fisher Heracell 150i):维持细胞培养环境稳定。

总结

细胞增殖检测是评估药物效果、基因功能及环境因素对细胞生长影响的核心实验技术。通过合理选择检测方法与仪器,研究人员能够高效获取细胞增殖的动态数据,为肿瘤学、免疫学及再生医学等领域的研究提供关键支持。


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实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

细胞增殖检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(细胞增殖检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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