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总胆汁酸测定试剂盒(酶循环法)指标试验

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-15     点击数:

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总胆汁酸测定试剂盒(酶循环法)指标试验分析

检测样品

本试验的检测样品为人体血清或血浆。样品需通过标准采血管(如含分离胶或肝素抗凝管)采集,并在采集后2小时内分离出血清或血浆,避免溶血、脂血或黄疸等干扰因素。短期保存需置于2-8℃环境,长期保存建议在-20℃以下冷冻。

检测项目

检测项目为血清或血浆中总胆汁酸(Total Bile Acids, TBA)的浓度。总胆汁酸是肝脏代谢胆固醇的产物,其浓度异常升高常见于肝胆疾病(如肝炎、肝硬化、胆道梗阻)及妊娠期肝内胆汁淤积症等。通过测定TBA水平,可评估肝脏功能及胆汁酸代谢状态。

检测方法

本试验采用酶循环法(Enzymatic Cycling Method),该方法基于特异性酶促反应与循环放大技术,具有灵敏度高、特异性强、线性范围宽的特点。

反应原理

  1. 样本中的总胆汁酸在3α-羟基类固醇脱氢酶(3α-HSD)催化下,与氧化型辅酶Ⅰ(NAD⁺)反应生成3-酮类固醇和还原型辅酶Ⅰ(NADH)。
  2. 硫代硝基苯甲酸(Thio-NAD⁺)作为电子受体,在硫辛酰胺脱氢酶(Diaphorase)作用下,将NADH重新氧化为NAD⁺,同时生成黄色产物Thio-NADH。
  3. 通过检测Thio-NADH在405 nm波长处的吸光度变化,计算总胆汁酸浓度。

操作步骤

  • 取待测样本与试剂按比例混合,37℃恒温孵育5分钟。
  • 使用生化分析仪测定反应体系的吸光度变化速率(ΔA/min),结合标准曲线或系数法计算浓度。

检测仪器

本试验推荐使用全自动生化分析仪,需满足以下条件:

  • 波长范围:支持主波长405 nm与副波长600 nm(用于消除样本浑浊干扰)。
  • 温控系统:37±0.1℃恒温精度。
  • 数据处理:内置校准程序,支持多点定标(至少两点)及质控分析。

常用仪器型号包括:

  • 日立(Hitachi)7180/7600系列
  • 罗氏(Roche)Cobas c501/c702
  • 贝克曼库尔特(Beckman Coulter)AU5800

结论

总胆汁酸测定试剂盒(酶循环法)通过高灵敏度的酶循环反应,能够快速、准确地评估肝胆功能状态,适用于临床诊断与健康筛查。试验过程需严格控制样本质量、试剂稳定性及仪器参数,以确保结果可靠性。


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实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

总胆汁酸测定试剂盒(酶循环法)指标试验流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(总胆汁酸测定试剂盒(酶循环法)指标试验)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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