信息概要

代谢物免疫印迹检测（Western Blot）是一种广泛应用于蛋白质检测的高特异性技术，通过抗体与目标蛋白的结合实现对特定代谢物的定性与半定量分析。该技术结合了电泳分离与免疫检测的优势，能够精确识别低丰度蛋白，在疾病诊断、生物标志物筛选、药物研发及基础研究中具有重要价值。第三方检测机构提供专业、高效的Western Blot服务，确保数据准确性和可重复性，为客户提供可靠的科研与临床支持。

检测项目

葡萄糖转运蛋白GLUT1, 脂肪酸合成酶FASN, 丙酮酸激酶PKM2, 乳酸脱氢酶LDH, 乙酰辅酶A羧化酶ACC, 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK, 苹果酸酶ME1, 己糖激酶HK2, 三磷酸腺苷合酶ATP5A, 琥珀酸脱氢酶SDHB, 细胞色素C氧化酶COX4, 过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ, 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR, 腺苷酸活化蛋白激酶AMPK, 缺氧诱导因子HIF-1α, 核因子κB p65, 白细胞介素IL-6, 肿瘤坏死因子TNF-α, 转化生长因子TGF-β, 胰岛素受体底物IRS1

检测范围

糖代谢相关蛋白, 脂代谢相关蛋白, 氨基酸代谢相关蛋白, 能量代谢相关酶, 信号通路调控蛋白, 炎症因子, 细胞因子, 氧化应激标志物, 线粒体功能蛋白, 转录因子, 表观遗传修饰酶, 自噬相关蛋白, 凋亡相关蛋白, 细胞周期调控蛋白, 受体酪氨酸激酶, 膜转运蛋白, 免疫检查点蛋白, 肿瘤标志物, 神经递质合成酶, 激素受体

检测方法

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）：通过变性电泳分离蛋白质混合物。

湿式转印法：将凝胶中的蛋白转移至PVDF或NC膜。

半干转印法：快速高效的蛋白转印技术。

封闭处理：使用BSA或脱脂牛奶阻断非特异性结合位点。

一抗孵育：特异性识别目标蛋白的一级抗体反应。

二抗孵育：标记酶或荧光基团的二级抗体放大信号。

化学发光法（ECL）：通过辣根过氧化物酶催化发光底物检测。

荧光Western Blot：采用荧光标记二抗进行多色检测。

定量分析：通过灰度扫描和软件计算蛋白表达量。

内参校正：使用β-actin或GAPDH等管家蛋白标准化数据。

磷酸化蛋白检测：针对磷酸化位点的特异性抗体分析。

糖基化蛋白检测：通过凝集素或糖基化抗体识别修饰。

膜蛋白提取：采用去垢剂处理分离膜结合蛋白。

低丰度蛋白富集：免疫沉淀预处理提高检测灵敏度。

多重检测：同一膜上同时分析多个目标蛋白。

检测仪器

垂直电泳槽, 转印装置, 化学发光成像系统, 荧光扫描仪, 微量分光光度计, 离心机, 恒温摇床, 微波炉, 磁力搅拌器, pH计, 电子天平, 超纯水系统, 微量移液器, 凝胶成像系统, 低温高速离心机