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核酸检测标准操作指南
一、检测样品
核酸检测的主要样品类型包括:
- 咽拭子:采集咽喉部黏膜细胞,适用于大规模筛查及疑似病例检测。
- 鼻拭子:提取鼻腔深部分泌物,灵敏度较高,常用于重点人群监测。
- 血液样本:用于特定研究或抗体联合检测,需配合血清分离操作。
- 环境样本:如物体表面涂抹样本,用于公共场所病毒污染监测。
所有样品需在采集后2小时内低温保存(2~8℃),并在24小时内完成检测,超时需转移至-70℃超低温环境。
二、检测项目
- 核酸定性检测:判断样本中是否含有目标病毒核酸,为确诊感染的核心依据。
- 变异株筛查:针对病毒基因序列特定区域进行扩增,识别常见变异株类型(如Alpha、Delta、Omicron等)。
- 定量分析(Ct值):通过循环阈值评估病毒载量,辅助判断感染阶段及治疗效果。
三、检测方法
-
实时荧光RT-PCR法
- 原理:通过逆转录酶将病毒RNA转化为DNA,利用荧光探针标记靶标基因,实时监测扩增信号。
- 步骤:核酸提取→试剂配制→扩增反应→结果分析。
- 适用性:高灵敏度、高特异性,适用于临床诊断及流行病学调查。
-
高通量测序法
- 原理:对病毒全基因组进行测序,用于溯源分析及新变异株鉴定。
- 步骤:文库构建→测序→生物信息学分析。
- 适用性:科研级检测,适用于病毒进化研究与公共卫生预警。
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等温扩增技术(如LAMP法)
- 原理:在恒温条件下快速扩增目标核酸,无需复杂仪器。
- 步骤:样本处理→恒温反应→肉眼判读结果。
- 适用性:适用于基层筛查或应急场景。
四、检测仪器
-
实时荧光定量PCR仪
- 型号:ABI 7500、Bio-Rad CFX96等。
- 功能:完成核酸扩增及荧光信号采集,输出Ct值报告。
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核酸提取仪
- 型号:Qiagen QIAcube、KingFisher Flex等。
- 功能:自动化提取纯化核酸,提升检测效率与一致性。
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高通量测序仪
- 型号:Illumina NovaSeq 6000、Oxford Nanopore MinION等。
- 功能:实现病毒全基因组测序,支持大数据分析。
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生物安全柜
- 型号:Class II A2型。
- 功能:保障样本处理环节的生物安全性,防止交叉污染。
五、质量控制要求
- 内参基因检测:每批次实验需加入人源内参基因(如RNase P),确保采样有效性。
- 阴阳性对照:每轮检测需包含阴性对照(无核酸水)及阳性对照(含靶标序列的标准品)。
- 重复检测:对临界值样本(Ct值37-40)需重复检测或采用其他方法验证。
通过标准化操作流程与严格质控,核酸检测可有效支撑疾病诊断、疫情防控及科研分析需求。
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实验仪器
测试流程

注意事项
1.具体的试验周期以工程师告知的为准。
2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。
3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。
4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异
5.如果对于(核酸检测小组要求检测标准)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。