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流式抗体检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-09     点击数:

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流式抗体检测技术解析与应用

一、检测样品 流式抗体检测的样品类型广泛,主要适用于各类细胞悬液。常见的检测样品包括:

  • 外周血单个核细胞(PBMC):从血液中分离的淋巴细胞、单核细胞等。
  • 培养细胞:如肿瘤细胞系、原代细胞或干细胞等。
  • 组织样本:通过机械或酶解法制备的实体组织细胞悬液(如脾脏、淋巴结)。
  • 体液样本:如脑脊液、胸腔积液或骨髓液中的游离细胞。

二、检测项目 流式抗体检测的核心目标是分析细胞表面或内部的特定抗原表达,主要应用于以下领域:

  1. 免疫表型分析:鉴定免疫细胞亚群(如T细胞、B细胞、NK细胞)及其活化状态。
  2. 肿瘤标志物检测:筛查白血病、淋巴瘤等疾病的特异性抗原(如CD19、CD34)。
  3. 细胞功能研究:检测细胞因子、增殖标记(如Ki-67)或凋亡相关蛋白(如Annexin V)。
  4. 干细胞与分化研究:追踪干细胞表面标志物(如CD133、CD44)的表达变化。

三、检测方法 流式抗体检测基于流式细胞术(Flow Cytometry),主要流程包括以下步骤:

  1. 样品制备:通过裂解红细胞或组织消化获得单细胞悬液,调整细胞密度至合适浓度。
  2. 抗体标记:将荧光标记的单克隆抗体与细胞孵育,使抗体与目标抗原特异性结合。
  3. 数据采集:使用流式细胞仪对细胞进行多参数分析,捕获荧光信号与散射光信号。
  4. 数据分析:通过专业软件(如FlowJo、BD FACSDiva)解析数据,生成细胞亚群比例、荧光强度等结果。

四、检测仪器 流式抗体检测依赖高精度仪器完成,常用设备包括:

  • 流式细胞仪:如BD FACSCanto™ II、Beckman Coulter CytoFLEX,支持多激光通道(如488 nm、640 nm)和多荧光检测。
  • 离心机:用于细胞洗涤与沉淀(如Eppendorf Centrifuge 5810 R)。
  • 恒温孵育箱:控制抗体与细胞反应的温度与时间(如Thermo Scientific Heracell™ 150i)。
  • 数据分析软件:如BD FACSDiva™、FlowJo™,提供细胞圈门、统计与可视化功能。

五、技术优势与展望 流式抗体检测凭借高通量、高灵敏度和多参数分析能力,成为基础研究与临床诊断的重要工具。未来,随着新型荧光染料(如串联染料)和质谱流式技术(CyTOF)的发展,其应用范围将进一步扩展至单细胞组学与精准医疗领域。

(本文内容仅供参考,具体检测需依据实验室标准操作流程。)

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

流式抗体检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(流式抗体检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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