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- 检测样品:需要明确样品的类型,比如细胞类型、来源,例如血液、培养的细胞等。可能还要提到样品的处理方式,如抗凝剂使用、保存条件等。
- 检测项目:常见的流式检测项目有哪些?比如细胞表面标记物(CD分子)、细胞内细胞因子、细胞周期分析、凋亡检测等。需要具体列出几个例子,并简要说明其应用。
- 检测方法:流式细胞术的基本步骤,包括样品制备、染色过程(如抗体孵育)、上机检测。可能需要详细说明每一步骤,比如细胞固定、破膜处理(如果是胞内染色),以及使用的缓冲液等。
- 检测仪器:需要列出常用的流式细胞仪型号,比如BD的FACSCanto、Beckman Coulter的CytoFLEX等,并简要介绍仪器的参数,如激光器配置、检测通道数、分析软件等。
用户还要求避免使用代码和注释,所以内容要保持专业但通俗易懂,适合网页文章的阅读习惯。可能需要加入一些实际应用的例子,比如在免疫学研究或临床诊断中的应用,以增加文章的实用性。
需要检查是否有遗漏的部分,比如数据分析和结果解读是否要包含,但用户没有特别提到,可能不需要详细展开。重点放在样品、项目、方法和仪器上。
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流式细胞试验检测在细胞分析中的应用
引言
流式细胞试验是一种基于激光散射和荧光信号的高通量检测技术,能够对单细胞或多颗粒悬液进行快速、多参数的定量分析。该技术广泛应用于免疫学、肿瘤学、药物研发及临床诊断等领域。本文将从检测样品、检测项目、检测方法及仪器等方面介绍流式细胞试验的核心内容。
检测样品
流式细胞试验的检测样品通常为单细胞悬液,包括但不限于以下类型:
- 外周血或骨髓样本:通过密度梯度离心法分离出单个核细胞。
- 培养细胞:贴壁细胞需经胰酶消化后制备成悬液,悬浮细胞可直接使用。
- 组织样本:通过机械破碎或酶消化法(如胶原酶处理)获取单细胞。
- 体液或其他生物液体:如胸腹水、脑脊液等需经离心浓缩处理。
所有样品需避免聚集,并在检测前用磷酸盐缓冲液(PBS)调整至适当浓度(通常为1×10^6~1×10^7 cells/mL)。
检测项目
流式细胞试验可同时检测多个靶标,常见项目包括:
- 细胞表面标志物:如免疫细胞分型(CD3、CD4、CD8、CD19等)。
- 细胞内因子:如细胞因子(IFN-γ、IL-2)、转录因子(FoxP3)的检测需固定和破膜处理。
- 细胞功能分析:包括细胞凋亡(Annexin V/PI双染)、细胞周期(PI或DAPI染色)、活性氧(ROS)水平等。
- 细胞增殖与信号通路:通过CFSE染色或磷酸化蛋白(p-STAT、p-AKT)检测实现。
检测方法
1. 样品预处理
- 表面标志物检测:细胞悬液与荧光标记抗体在4℃避光孵育15~30分钟,洗涤后重悬于PBS。
- 胞内蛋白检测:需先用4%多聚甲醛固定细胞,再用通透剂(如Triton X-100)破膜,随后进行抗体孵育。
- DNA含量分析:使用RNA酶处理后,加入碘化丙啶(PI)或DAPI染色。
2. 上机检测
将处理后的样品通过流式细胞仪进样针吸入,仪器自动采集前向散射光(FSC)、侧向散射光(SSC)及荧光信号。
3. 数据分析
通过FlowJo、BD FACSDiva或CytExpert等软件,设门排除碎片和粘连体,分析目标细胞群的比例及荧光强度。
检测仪器
流式细胞试验的核心设备为流式细胞仪,常见型号及特点如下:
- BD FACSCanto™ II:配置3激光(488nm、633nm、405nm),可检测8色荧光,适用于临床免疫分型。
- Beckman Coulter CytoFLEX:模块化设计,支持13色分析,具备高灵敏度和低样本量需求。
- Sony ID7000™:支持7激光64色检测,适用于多参数高通量研究。
仪器需定期校准(如使用CST微球)并优化电压和补偿参数,以确保数据准确性。
总结
流式细胞试验通过多参数分析为细胞学研究提供了高效的技术支持。未来,随着光谱流式和质谱流式技术的发展,其应用范围将进一步拓展,为精准医学和转化研究提供更全面的数据支撑。
实验仪器
测试流程

注意事项
1.具体的试验周期以工程师告知的为准。
2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。
3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。
4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异
5.如果对于(流式细胞试验检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。