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全基因组转录组检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-09     点击数:

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全基因组转录组检测技术解析与应用

一、检测样品 全基因组转录组检测适用于多种生物样本,包括但不限于动植物组织、细胞培养物、血液、唾液及微生物样本。样品需满足高质量RNA提取要求,建议使用新鲜样本或经液氮速冻后保存于-80℃的样本,避免反复冻融。运输过程中需采用干冰或低温冷链,确保RNA完整性。

二、检测项目

  1. 基因表达谱分析:全面检测样本中所有基因的表达水平,揭示基因在不同生理或病理状态下的调控模式。
  2. 差异表达基因筛选:通过组间对比,识别显著上调和下调的基因,挖掘潜在生物标志物。
  3. 功能富集分析:对差异基因进行GO(基因本体)和KEGG(京都基因与基因组百科全书)通路分析,解析生物学功能。
  4. 可变剪切事件检测:识别转录本的可变剪切形式,探索基因表达的复杂性。
  5. 非编码RNA分析:涵盖miRNA、lncRNA等非编码RNA的表达与功能研究。

三、检测方法

  1. RNA提取与质控 采用TRIzol法或磁珠法提取总RNA,通过Agilent 2100生物分析仪检测RNA完整性(RIN值≥7),并使用Qubit荧光定量仪测定浓度。
  2. 文库构建 利用Illumina TruSeq Stranded mRNA建库试剂盒,完成mRNA富集、片段化、逆转录及双端接头连接,构建高通量测序文库。
  3. 高通量测序 基于Illumina NovaSeq 6000平台进行双端测序(PE150),单样本数据量≥6 Gb,确保基因覆盖深度。
  4. 数据分析 原始数据经质控过滤后,使用HISAT2比对参考基因组,StringTie进行转录本组装,DESeq2分析差异表达,ClusterProfiler完成功能注释。

四、检测仪器

  1. Agilent 2100生物分析仪:用于RNA完整性检测,确保样本符合测序要求。
  2. Illumina NovaSeq 6000:高通量测序核心设备,支持大规模并行测序。
  3. Qubit 4.0荧光定量仪:精准测定RNA浓度,避免传统分光光度法的干扰。
  4. 高性能计算集群:搭载生物信息分析软件(如TopHat、Cufflinks),完成数据挖掘与可视化。

五、技术优势与应用场景 全基因组转录组检测可全面解析基因表达动态,广泛应用于疾病机制研究(如癌症、神经退行性疾病)、药物靶点筛选、农业育种及环境胁迫响应等领域。其高灵敏度与高分辨率特性,为精准医学和分子生物学研究提供关键数据支撑。

结语 随着测序成本的降低和生物信息学工具的完善,全基因组转录组检测已成为生命科学研究的常规手段。通过标准化实验流程与智能化数据分析,该技术将持续推动基础研究与临床转化的深度融合。

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

全基因组转录组检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(全基因组转录组检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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