检测自噬的检测标准

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信息概要

自噬检测是评估细胞内自噬活动水平的关键技术，用于研究细胞代谢、疾病机制及药物开发等领域。该检测通过分析自噬相关标志物、结构变化及功能状态，为科研和临床提供重要数据支持。检测自噬的标准化流程可确保结果的可重复性和准确性，对理解细胞稳态、癌症、神经退行性疾病等具有重要意义。

检测项目

LC3-I/LC3-II蛋白比值，p62/SQSTM1蛋白降解水平，自噬小体数量，自噬流速率，溶酶体活性，ATG蛋白表达量，Beclin-1相互作用分析，自噬相关基因表达（如ATG5、ATG7），线粒体自噬（Mitophagy）标志物，ER-phagy标志物，自噬抑制剂/诱导剂效应验证，透射电镜观察自噬结构，荧光标记LC3点状聚集，细胞存活率与自噬关联性，自噬溶酶体融合效率，ROS水平与自噬关系，mTOR信号通路活性，ULK1磷酸化状态，细胞能量代谢指标（ATP/AMP比值），自噬相关microRNA表达谱。

检测范围

哺乳动物细胞系（如HeLa、HEK293），原代细胞（肝细胞、神经元），肿瘤组织样本，转基因动物模型（小鼠、斑马鱼），临床活检组织，类器官模型，植物细胞样本，酵母模型，血液样本（外周血单核细胞），脑脊液细胞，干细胞分化模型，药物筛选模型，病原体感染细胞模型，衰老细胞模型，免疫细胞（T细胞、巨噬细胞），脑组织切片，肠道微生物共培养系统，3D细胞培养模型，线粒体分离样本，外泌体与自噬关联分析。

检测方法

Western Blot：通过LC3-II/I比值及p62蛋白定量分析自噬流。

透射电子显微镜（TEM）：直接观察自噬小体及溶酶体超微结构。

荧光显微镜成像：利用GFP-LC3转染细胞检测自噬小体形成。

流式细胞术：定量分析LC3阳性细胞比例及溶酶体pH值。

qRT-PCR：检测自噬相关基因（ATG家族）的mRNA表达水平。

免疫组化（IHC）：组织切片中定位自噬标志物表达。

酶标仪检测：基于LysoTracker探针的溶酶体活性分析。

细胞活力检测：CCK-8/MTT法评估自噬与细胞存活关联性。

自噬报告基因系统：使用mRFP-GFP-LC3双荧光探针区分自噬流阶段。

蛋白质降解速率测定：放射性标记追踪长寿命蛋白降解。

免疫荧光共定位：分析LC3与溶酶体标记物（LAMP1）共定位程度。

ATP含量检测：通过生物发光法评估细胞能量状态与自噬关系。

自噬小体计数：图像分析软件定量荧光点状结构数量。

溶酶体酶活性检测：Cathepsin B/L活性比色法。

代谢组学分析：LC-MS检测自噬相关代谢物变化。

检测仪器

透射电子显微镜，荧光显微镜，流式细胞仪，酶标仪，实时荧光定量PCR仪，蛋白质电泳系统，化学发光成像仪，超速离心机，细胞培养箱，激光共聚焦显微镜，显微成像分析系统，高效液相色谱仪（HPLC），质谱仪（LC-MS），多功能酶标仪，生物分析仪。

实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

5.如果对于（检测自噬的检测标准）还有什么疑问，可以咨询我们的工程师为您一一解答。