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猪瘟检测技术要点解析

猪瘟（Classical Swine Fever，CSF）是由猪瘟病毒引起的高度接触性传染病，严重威胁生猪养殖业。为有效防控疫情，科学规范的检测技术是核心环节。本文将围绕检测样品、检测项目、检测方法及检测仪器展开说明。

一、检测样品类型

检测样品的选择直接影响结果的准确性。常用样本包括：

1. 活体样本：全血、血清、扁桃体拭子及淋巴结组织。
2. 病死猪样本：脾脏、肾脏、肝脏等器官组织，以及肠道内容物。
3. 环境样本：养殖场内的污水、饲料及运输工具表面擦拭物。

样本需在无菌条件下采集，低温保存并尽快送检，避免反复冻融。

二、核心检测项目

猪瘟检测主要分为两类：

1. 病原学检测：针对病毒抗原或核酸，用于确诊急性感染。包括病毒分离鉴定、荧光定量RT-PCR检测等。
2. 血清学检测：检测特异性抗体（如IgG、IgM），适用于流行病学调查与免疫效果评估，常用ELISA、中和试验等方法。

三、主要检测方法

（一）病原学检测

1. 病毒分离培养 将样本接种PK-15细胞系，观察细胞病变效应（CPE），结合荧光抗体染色确认病毒存在。该方法为"金标准"，但耗时较长（3-5天）。

2. 实时荧光定量RT-PCR 提取样本RNA后，针对病毒保守基因（如E2基因）设计特异性引物探针。采用TaqMan探针法，可在2小时内完成检测，灵敏度达10^2拷贝/μL。

（二）血清学检测

1. 阻断ELISA 使用预包被病毒抗原的微孔板，通过酶标单抗竞争结合原理检测抗体。结果判读采用阻断率计算： 阻断率（%）=（阴性对照OD值 - 样本OD值）/阴性对照OD值 × 100% ≥40%判定为阳性，30-40%为可疑，需复检。

2. 间接免疫荧光试验（IFA） 将病毒感染的细胞固定于载玻片，加入待检血清后观察荧光信号。需配备荧光显微镜，适用于实验室确诊。

四、关键检测仪器

1. 核酸提取仪：磁珠法全自动提取设备（通量可达96样本/次），确保RNA提取纯度（A260/A280值1.8-2.0）。
2. 实时荧光PCR仪：支持多重检测通道，具备熔解曲线分析功能，温度均一性≤±0.3℃。
3. 酶标仪：配备450nm/630nm双波长检测系统，支持动力学扫描模式。
4. 生物安全柜：达到Ⅱ级A2型标准，保障活病毒操作安全。
5. 倒置荧光显微镜：配备LED光源及FITC滤光片组（激发波长490nm，发射波长525nm）。

五、质量控制要点

实验室应通过能力验证（PT）考核，每批次检测设置阴性对照、阳性对照及内参基因。核酸检测需监控Ct值波动范围（CV≤5%），ELISA试验要求阴性对照OD值≥0.8。所有仪器需定期校准，温度依赖设备（如PCR仪）每月进行温度验证。

通过规范化的检测流程与质量控制，可实现猪瘟病毒的早期发现与精准诊断，为疫情防控提供关键技术支持。养殖企业应配合官方监测计划，定期送检样本，共同构建生物安全防护体系。

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实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

5.如果对于（猪瘟检测技术检测标准）还有什么疑问，可以咨询我们的工程师为您一一解答。