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猴痘病毒检测方法标准参考

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-18     点击数:

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猴痘病毒检测方法标准参考指南

一、检测样品

猴痘病毒检测的常见样品类型包括:

  1. 皮肤病变样本:如疱疹液、痂皮或皮肤拭子;
  2. 血液样本:用于检测病毒核酸或抗体;
  3. 咽拭子或鼻咽拭子:适用于早期感染者的呼吸道分泌物检测;
  4. 其他体液:如脑脊液(疑似神经系统并发症时采集)。 所有样品需在无菌条件下采集,并严格按照生物安全要求保存与运输(建议2–8℃冷藏,长期保存需-70℃以下冷冻)。

二、检测项目

猴痘病毒检测的核心项目包括:

  • 病毒核酸检测(定性或定量检测病毒DNA);
  • 病毒抗原检测(快速筛查病毒蛋白);
  • 血清抗体检测(IgM/IgG抗体,用于感染分期分析);
  • 病毒分离与培养(科研或特殊病例确认)。

三、检测方法

1. 实时荧光定量PCR法

原理:针对猴痘病毒特异性基因片段(如F3L、B6R等)设计引物与探针,通过PCR扩增并实时监测荧光信号。 步骤

  • 样品核酸提取(推荐使用商业化核酸提取试剂盒);
  • 配制PCR反应体系;
  • 上机运行并分析扩增曲线与Ct值。

2. 酶联免疫吸附试验(ELISA)

原理:利用包被的猴痘病毒抗原捕获样本中的特异性抗体,通过酶标二抗显色定量分析。 步骤

  • 样品稀释与加样;
  • 孵育、洗涤后加入酶结合物;
  • 显色终止反应,测定OD值。

3. 病毒分离培养

原理:将样本接种于Vero细胞系,观察细胞病变效应(CPE),结合PCR或电镜确认病毒存在。 步骤

  • 样品预处理与细胞接种;
  • 培养3–7天,每日观察细胞形态;
  • 阳性结果需进一步验证。

四、检测仪器

以下为猴痘病毒检测常用仪器:

  • 实时荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Bio-Rad CFX96);
  • 核酸提取仪(如QIAcube、KingFisher Flex);
  • 酶标仪(如Thermo Multiskan GO);
  • 生物安全柜(Class II A2型,用于样品前处理);
  • 细胞培养箱(恒温CO2培养箱,用于病毒分离)。

结语

猴痘病毒检测需结合临床症状与流行病学史,选择适宜的样品类型和方法。核酸检测(PCR)为金标准,适用于早期诊断;抗体检测可用于追溯感染史。实验室操作应严格遵守生物安全规范,确保结果准确性与人员防护。


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实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

猴痘病毒检测方法标准参考流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(猴痘病毒检测方法标准参考)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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