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组织流式检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-09     点击数:

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组织流式检测技术:精准解析细胞特性的关键工具

检测样品

组织流式检测技术适用于多种生物样本,包括但不限于细胞悬液、组织切片、外周血样本以及体外培养的细胞系。常见的检测样品类型涵盖肿瘤组织、免疫细胞(如T细胞、B细胞、NK细胞)、干细胞及微生物感染样本等。为确保检测结果的准确性,样品需经过标准化处理,例如通过酶解或机械破碎法将组织分散为单细胞悬液,并去除碎片和杂质。

检测项目

组织流式检测的核心目标是对细胞进行多参数定量分析,具体检测项目包括:

  1. 免疫表型分析:通过标记特异性抗体,识别细胞表面或胞内蛋白(如CD分子、细胞因子受体),解析免疫细胞亚群分布及功能状态。
  2. 细胞周期与增殖分析:利用DNA染料(如PI、DAPI)评估细胞周期各阶段比例,研究药物或基因对细胞增殖的影响。
  3. 细胞凋亡与活性检测:通过Annexin V/PI双染法或线粒体膜电位探针,区分活细胞、早期凋亡细胞及坏死细胞。
  4. 细胞因子与信号通路分析:检测细胞内磷酸化蛋白或分泌型因子,揭示信号转导通路激活状态。

检测方法

组织流式检测遵循标准化实验流程,主要步骤包括:

  • 样本制备:将组织样本处理为单细胞悬液,并通过过滤去除团块;使用荧光标记抗体对目标抗原进行特异性染色。
  • 数据采集:将染色后的细胞悬液上样至流式细胞仪,通过激光激发荧光信号,由光电倍增管(PMT)捕获散射光和荧光参数。
  • 数据分析:利用专业软件(如FlowJo、BD FACSDiva)对原始数据进行补偿校正、设门分析及统计学处理,生成细胞亚群比例、荧光强度等定量结果。

检测仪器

组织流式检测的核心设备为流式细胞仪,其关键组件包括:

  • 激光器:提供不同波长的激发光(如488 nm蓝激光、633 nm红激光),适配多种荧光染料。
  • 光学系统:由透镜、滤光片和分光镜组成,用于分离和收集散射光及荧光信号。
  • 检测器:光电倍增管(PMT)将光信号转化为电信号,实现高灵敏度检测。
  • 液流系统:通过鞘液包裹单细胞流,确保细胞逐一通过检测区域。

主流品牌包括BD Biosciences(如BD FACSCanto II)、Beckman Coulter(如CytoFLEX)及Thermo Fisher(如Attune NxT)。辅助设备涵盖离心机、涡旋振荡器及生物安全柜,共同保障实验的稳定性和重复性。

结语

组织流式检测凭借其高通量、多参数的优势,已成为生命科学研究和临床诊断的重要工具。通过精准解析细胞特性,该技术为疾病机制研究、药物筛选及个体化治疗提供了关键数据支持。未来,随着新型荧光探针和自动化分析算法的发展,其应用场景将进一步拓展,推动精准医学迈向更高水平。

(本文内容仅供参考,具体实验方案需结合实际情况调整。)

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

组织流式检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(组织流式检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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