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蛋白质组学检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-09     点击数:

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基于蛋白质组学的样本检测分析报告

引言

蛋白质组学作为系统生物学研究的重要分支,能够全面揭示生物体内蛋白质的表达、修饰及相互作用信息。本研究通过高通量蛋白质组学技术对目标样本进行深度分析,为后续功能研究与临床应用提供数据支持。

检测样品

本次检测的样本类型为人类肝癌组织与癌旁正常组织(各5例),样本采集后经液氮速冻并保存于-80℃超低温冰箱。所有样本均通过伦理审查,确保符合生物医学研究规范。

检测项目

  1. 蛋白质表达谱分析:鉴定样本中差异表达蛋白;
  2. 蛋白质翻译后修饰分析:重点关注磷酸化与泛素化修饰;
  3. 蛋白质相互作用网络:构建关键蛋白的功能调控网络。

检测方法

  1. 样品前处理 采用FASP(Filter-Aided Sample Preparation)法进行蛋白质提取与酶解,使用胰蛋白酶将蛋白质消化为肽段,并经C18固相萃取柱脱盐纯化。

  2. 液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS) 肽段混合物通过纳升级液相色谱系统(EASY-nLC 1200)分离,以色谱梯度洗脱后进入高分辨质谱仪进行分析。质谱数据采集模式为DDA(Data-Dependent Acquisition),扫描范围覆盖m/z 350-1500。

  3. 数据分析 原始数据经MaxQuant软件处理,匹配UniProt人类蛋白质数据库进行定性定量分析。差异蛋白筛选标准为:Fold Change ≥2.0或≤0.5,p值<0.05;功能注释通过GO、KEGG数据库完成。

检测仪器

  1. 质谱仪:Thermo Fisher Orbitrap Fusion Lumos;
  2. 液相色谱仪:Thermo Scientific EASY-nLC 1200;
  3. 离心机:Eppendorf Centrifuge 5424R;
  4. 超声波破碎仪:Covaris M220 Focused-ultrasonicator。

结果与结论

本研究共鉴定到5,200种蛋白质,其中肝癌组织与癌旁组织间差异表达蛋白326个(上调162个,下调164个)。显著富集的通路包括“PI3K-AKT信号通路”和“代谢重编程”。此外,磷酸化修饰分析提示EGFR、STAT3等蛋白的异常激活可能与肿瘤进展相关。

结语

蛋白质组学技术为疾病机制解析提供了高精度的分子图谱。本研究的检测流程与数据分析策略可为同类研究提供参考,同时为肝癌靶向治疗标志物的筛选奠定基础。

(注:本文内容为模拟分析报告,实际数据需以实验为准。)

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

蛋白质组学检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(蛋白质组学检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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