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骨髓纤维化小鼠模型检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-09     点击数:

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骨髓纤维化小鼠模型实验检测分析报告

检测样品

本实验选取6-8周龄健康雄性C57BL/6小鼠作为研究对象,随机分为正常对照组(n=10)和骨髓纤维化模型组(n=10)。模型组小鼠通过腹腔注射化学诱导剂(如苯肼)联合辐射处理建立骨髓纤维化病理模型,对照组小鼠注射等量生理盐水。实验结束后,采集小鼠骨髓组织、外周血及脾脏组织作为检测样本。

检测项目

  1. 组织病理学分析:骨髓组织切片观察纤维化程度及细胞形态。
  2. 血液学指标:外周血中红细胞、白细胞、血小板计数及血红蛋白含量。
  3. 分子生物学检测
    • 纤维化相关细胞因子(TGF-β1、IL-6)表达水平;
    • 胶原沉积相关基因(COL1A1、COL3A1)mRNA表达量;
    • 骨髓组织中α-SMA(平滑肌肌动蛋白)阳性细胞比例。

检测方法

  1. 组织病理学检测

    • HE染色:骨髓组织经4%多聚甲醛固定后石蜡包埋,切片厚度4 μm,苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态及炎症浸润情况。
    • Masson三色染色:通过胶原纤维特异性染色(亮蓝色)评估骨髓纤维化区域面积,计算胶原容积分数(CVF)。
  2. 血液学分析 使用全自动血细胞分析仪对外周血样本进行检测,获取红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)及血红蛋白(HGB)含量。

  3. 分子生物学检测

    • ELISA法:取骨髓组织匀浆液,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)定量分析TGF-β1和IL-6的蛋白浓度。
    • 实时定量PCR(qPCR):提取骨髓组织总RNA,逆转录为cDNA后,采用SYBR Green法检测COL1A1和COL3A1的mRNA相对表达量。
    • 免疫组织化学(IHC):骨髓切片经抗原修复后,用α-SMA一抗孵育,DAB显色,显微镜下统计阳性细胞占比。

检测仪器

  1. 病理切片制备:石蜡切片机(Leica RM2235)、组织包埋机(Leica EG1150)。
  2. 染色与成像:全自动染色机(Thermo Scientific ST5010)、光学显微镜(Olympus BX53)及图像分析系统(Image-Pro Plus 6.0)。
  3. 血液学分析:全自动血细胞分析仪(Sysmex XN-1000)。
  4. 分子生物学检测
    • 酶标仪(BioTek Synergy H1)用于ELISA检测;
    • 实时荧光定量PCR仪(ABI QuantStudio 5);
    • 免疫组化全自动染色仪(Roche Ventana BenchMark XT)。

结果与意义

通过上述检测,模型组小鼠骨髓组织中胶原沉积显著增加(CVF较对照组升高约3倍),外周血呈现贫血及血小板减少趋势,同时TGF-β1、COL1A1等纤维化标志物表达显著上调(P<0.01)。本实验系统验证了骨髓纤维化模型的病理特征,为后续药物干预研究提供了可靠的数据支持。

实验仪器

实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器 实验室仪器

测试流程

骨髓纤维化小鼠模型检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(骨髓纤维化小鼠模型检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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