注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试望见谅。
品系名称:B6-PD1tm1小鼠
英文名称:B6-PD1tm1
疾病名称:免疫缺陷疾病
相关基因:PD1
背景品系:C57BL/6J小鼠
遗传类型:基因敲除近交系
繁殖方式:HOM X HOM
繁殖代数:6代
研究用途:用于PD-L/PD1信号通路对肿瘤生长影响的研究。
饲养环境:屏障设施
培育单位:北京华阜康生物科技股份有限公司
保种单位:北京华阜康生物科技股份有限公司
资源鉴定:已通过实验动物模型鉴定与评价工作委员会鉴定
鉴定日期:2020-04-29 00:00:00
PD1小鼠是北京华阜康生物科技股份有限公司自主研发的免疫模型小鼠,在小鼠的基因组敲除PD-1,构建的PD-L/PD1肿瘤信号通路研究的模型动物。 PD-1(programmed death 1)程序性死亡受体1,是T细胞表面的CD28家族的一个重要的负性共刺激分子。它通过和其配体程序性死亡因子配体-1/2(programmed death ligand-1/2,PD-L1/2)结合后负性调节免疫反应并维持外周免疫耐受,其最初是从凋亡的小鼠T细胞杂交瘤2B4.11克隆出来。PD-1 可诱导表达于活化的 T 细胞、B细胞、NK-T细胞以及激活的单核细胞表面。以PD-1为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植存活等均有重要的意义。其配体PD-L1也可作为靶点,相应的抗体也可以起到相同的作用。为了更加深入的探究PD-1基因在动物机体抵抗病毒感染的机制研究,最好的方式是建立该基因修饰动物模型作为研究工具
PD1小鼠是通过CRISPR-Cas9技术对在C57BL/6J背景的PD-1基因敲除而获得纯合突变小鼠。
粗蛋白≥23.0%、粗脂肪≥5.0%、粗灰分≤7.0%、粗纤维≤5.0%、水份≤10%、钙1.4%~1.5%、磷1.0%~1.1%、赖氨酸≥1.32%、蛋氨酸+胱氨酸≥0.78%
1. 生长曲线
2、解剖学特性与背景品系C57BL/6J相同。3、繁殖特性纯合子之间同胞兄妹间繁殖,繁殖能力一般,每胎产5-7只。4、自发异常
不规则脾 脾脏黑色素沉积
1、 PD-1 KO小鼠的制备背景小鼠C57BL/6J为近交系小鼠,是经过全基因组测序的小鼠,具有实验结果精度高、可比性好、应激反应均一等特点,是基因工程小鼠常用品系。基因设计信息Pdcd1 programmed cell death 1 [ Mus musculus (house mouse) ],Gene ID: 18566
2、 敲除设计设计敲除第二,三外显子。3、作用靶点设计GGAACATCTTGAACAGGAGTGGGM- PD1-EA1-gRNA up: TAGGAACATCTTGAACAGGAGTM- PD1–EA1-gRNA down: AAACACTCCTGTTCAAGATGTTGGAAGAGCCCTGCTTGTTGGAGGM- PD1-EA2-gRNA up: TAGGAAGAGCCCTGCTTGTTGGM- PD1–EA2-gRNA down: AAACCCAACAAGCAGGGCTCTTGGAACTCCCCGTTAGTAAATGGGM- PD1-EB1-gRNA up: TAGGAACTCCCCGTTAGTAAATM- PD1–EB1-gRNA down: AAACATTTACTAACGGGGAGTTGGGAGGACATTCCTCCACTAGGGM- PD1-EB2-gRNA up: TAGGGAGGACATTCCTCCACTAM- PD1–EB2-gRNA down: AAACTAGTGGAGGAATGTCCTC4.显微注射和基因型鉴定4.1显微注射①超数排卵:150只3-4周龄c57雌鼠注射激素进行超排。②受精卵注射:取约350枚受精卵进行注射。③雄鼠结扎:制作30只8周龄输精管结扎的c57雄鼠。④受体鼠制备:8-10周龄ICR雌鼠与结扎的ICR雄鼠交配后选取见栓的雌鼠。⑤胚胎移植:将注射后的受精卵移植到受体鼠输卵管壶腹部(移植一次, 350枚卵,15只受体鼠)。4.2 F0代小鼠基因鉴定引物:M-PD1-F1: CACTCCCACCTCACTATCCCACT 63.8M-PD1-R1: ACCAGAGTGTCGTCCTTGCTTC 63 WT=1819bp 经过基因型鉴定获得2只敲除小鼠(#1, #4)。
#1 del 492bp
tgcagacagctctgccacgtatctctggcttcctttctgcgctggaagatttcacataccttgtttgccaggtgttttgggcctcagt
tctccccccatccagcttctccctaactggcccctcttctttgcctctgacccctgctttctgagcccataaccttagctgtggcagca
cagcctctctctttgtacccctgggagggaaccatgcccggttagtattgtcaaataccccacatcagaggcgggtgtgaggttt
ggggtgcagtgccctgggccatgtaatcgggtagaattccctccctatatgactactcaatccgtgggaggagagggcagagg
gctggaaaggatgcagctggggacatgtctattcgcactggcgctttctctacgagccccagttgccaaatgactacatcggcta
aagagagctggcagcccagacagagttgaggccagagcagcttcaaagatgtcttggtgcctgtttcctgtgtgcatgtcagtct
cctctgggtaaggcccacatgtgtgtgctcagcaagtctgtatttccttgaccctgagccttctgaccgtacctacatacccaaccg
cacctatatacccgaccgcaggttcaactgctgacatcatatgggtcccagtagtgggtacttttgagtgctggtggaatgttatgt
gttatgtgtcagtgtgcatttatgtggcaagaagcttgccagtgcggcaggcatttcctgagaagagccatgagaccctgcatgct
gcctgaccctggcagtaccacccagaacactttatttgggtgagcctagaccttctgtccacttgagagacaatgacacagctgat
ctttggaggcttcttgctgtgacctctgatctggctggaagacatgactgctaccctatgccttctgctactcagggtagctctgacat
gcttggtgggctccctgggacaaaatactgcctggaccccaagcttactaaagaatccaccctctccaagtctgaggtttccatgga
aaccctacactcccacctcactatcccactgacccttcagacagaactaggctagccaaccagaagtctaagactggaacattcag
gtcaggcctggaacatcttgaacaggagtgggaaggtagagacatcttcggggaaaatatcccaaagtctcaaaggacagaata
gtagcctccagaccctaggttcagttatgctgaaggaagagccctgcttgttggaggttacttattcacaacctacaagaagctaca
agctcctaggtagggggaactgcttacgatattctgccctggaatgggtctgagagcacattcctctccagggggttcagaaaaga
tgtcagaaagggtgtacaggctccttcctcacagctctttgttcttctgcatttcagaggtccccaatgggccctggaggtccctcacct
tctacccagcctggctcacagtgtcagagggagcaaatgccaccttcacctgcagcttgtccaactggtcggaggatcttatgctga
actggaaccgcctgagtcccagcaaccagactgaaaaacaggccgccttctgtaatggtttgagccaacccgtccaggatgcccgc
ttccagatcatacagctgcccaacaggcatgacttccacatgaacatccttgacacacggcgcaatgacagtggcatctacctctgtg
gggccatctccctgcaccccaaggcaaaaatcgaggagagccctggagcagagctcgtggtaacaggtgaggctagtagaaccta
cgtgggcaattccttcctgcccagagacctcttaggctctctgccatggctctgcctagagccttgacgacactgcccctctccctgtgga
aatcctcagatgcccatttacctttaagggatggaagggcttgccaaagtagggtgggtggccagtcactgcccatctaaaatagtcc
cttgggacttggtgaggacagggtgtgtgaccctaaagaaaatacactatcggtgtcctagaactctattctttgtcatcctgtagagag
aatcctggagacctcaacaagatatcccagcccctcgcccaaaccagaaggccggtttcaaggcatggtcattggtatcatgagtgcc
ctagtgggtatccctgtattgctgctgctggcctgggccctagctgtcttctgctcaacaagtatgtcaggtaaggctcatcataccctgc
ttctgtcctgccaaaccttgtagtcactgtacttcacac
#4 del 1357 bp 留 ,繁殖一代
tgcagacagctctgccacgtatctctggcttcctttctgcgctggaagatttcacataccttgtttgccaggtgttttgggcctcagttctcc
ccccatccagcttctccctaactggcccctcttctttgcctctgacccctgctttctgagcccataaccttagctgtggcagcacagcctctc
tctttgtacccctgggagggaaccatgcccggttagtattgtcaaataccccacatcagaggcgggtgtgaggtttggggtgcagtgcc
ctgggccatgtaatcgggtagaattccctccctatatgactactcaatccgtgggaggagagggcagagggctggaaaggatgcagc
tggggacatgtctattcgcactggcgctttctctacgagccccagttgccaaatgactacatcggctaaagagagctggcagcccagac
agagttgaggccagagcagcttcaaagatgtcttggtgcctgtttcctgtgtgcatgtcagtctcctctgggtaaggcccacatgtgtgtg
ctcagcaagtctgtatttccttgaccctgagccttctgaccgtacctacatacccaaccgcacctatatacccgaccgcaggttcaactgct
gacatcatatgggtcccagtagtgggtacttttgagtgctggtggaatgttatgtgttatgtgtcagtgtgcatttatgtggcaagaagctt
gccagtgcggcaggcatttcctgagaagagccatgagaccctgcatgctgcctgaccctggcagtaccacccagaacactttatttggg
tgagcctagaccttctgtccacttgagagacaatgacacagctgatctttggaggcttcttgctgtgacctctgatctggctggaagacatg
actgctaccctatgccttctgctactcagggtagctctgacatgcttggtgggctccctgggacaaaatactgcctggaccccaagcttacta
aagaatccaccctctccaagtctgaggtttccatggaaaccctacactcccacctcactatcccactgacccttcagacagaactaggctag
ccaaccagaagtctaagactggaacattcaggtcaggcctggaacatcttgaacaggagtgggaaggtagagacatcttcggggaaaa
tatcccaaagtctcaaaggacagaatagtagcctccagaccctaggttcagttatgctgaaggaagagccctgcttgttggaggttacttat
tcacaacctacaagaagctacaagctcctaggtagggggaactgcttacgatattctgccctggaatgggtctgagagcacattcctctcca
gggggttcagaaaagatgtcagaaagggtgtacaggctccttcctcacagctctttgttcttctgcatttcagaggtccccaatgggccctgg
aggtccctcaccttctacccagcctggctcacagtgtcagagggagcaaatgccaccttcacctgcagcttgtccaactggtcggaggatctt
atgctgaactggaaccgcctgagtcccagcaaccagactgaaaaacaggccgccttctgtaatggtttgagccaacccgtccaggatgccc
gcttccagatcatacagctgcccaacaggcatgacttccacatgaacatccttgacacacggcgcaatgacagtggcatctacctctgtggg
gccatctccctgcaccccaaggcaaaaatcgaggagagccctggagcagagctcgtggtaacaggtgaggctagtagaacctacgtggg
caattccttcctgcccagagacctcttaggctctctgccatggctctgcctagagccttgacgacactgcccctctccctgtggaaatcctcaga
tgcccatttacctttaagggatggaagggcttgccaaagtagggtgggtggccagtcactgcccatctaaaatagtcccttgggacttggtga
ggacagggtgtgtgaccctaaagaaaatacactatcggtgtcctagaactctattctttgtcatcctgtagagagaatcctggagacctcaaca
agatatcccagcccctcgcccaaaccagaaggccggtttcaaggcatggtcattggtatcatgagtgccctagtgggtatccctgtattgctgc
tgctggcctgggccctagctgtcttctgctcaacaagtatgtcaggtaaggctcatcataccctgcttctgtcctgccaaaccttgtagtcactgta
cttcacacatacgtagatcaccagaagggtggtcatgcaccacacacactctgaccactacaaaagcctgtggccgccccacccacacctagc
ctcaggctgctggctttcctaaacaactagtgagagctgccacctccaggaggtctggtcatcagccagctaagaggccacagctaatatctgc
tacatgcctaccctgtgttgtggtacaccaggaaaggggacactgatgcacctgtgcctgtggcaggccctactcctcaattcattgtcctaccag
gaactccccgttagtaaatgggaagggtgcccgtggggatggaaaggctggtgcttgcccatggtgtagatctcttcagtgcctgacacgcccc
tcctgagcacacaaaacacacacacacacacacacacacacacacacacacacacacacgagagagaaagatggagagacagagggagg
acattcctccactagggaagatggctctgtagctgccctctaacccaaactgtgtgtctcaacagaggccagaggagctggaagcaaggacga
cactctggtgagtatgagttttctttcttgagtgatctatcccaggccacccccaggtcttggtacaggtagagagaccatggggcctacagggct
agagcctggagagcccagctcccattttctaccaggcccccagagccatatcctgttgttcctcccagcagctgaccccactgtgtgtacccctgtc
gtgtccaacgtggtcacgacttgttttcttctgtgcagagacaaggggcaaaagtcaaattttggaatcctaaacccgccaggaaacatttaacga
tagaaactgggccagaaacacgaggctgcaccctaaatatcaagaagtcaatggggagcctatggcctctgtgggttctgtgcctgggcagctg
ttaggtcaggtcccagcttccatgactgaggtgaatttgctctaagaagaaccccaaatccagtgtcagtctggaaacccagcatagggaagggt
tgagattatgggatgcacacaccaccccccaactgactataacaatggctctttcttctcccccctcccctgc
1.具体的试验周期以工程师告知的为准。
2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。
3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。
4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异
5.如果对于(B6-PD1tm1小鼠,动物试验)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。
上一篇: B6-Tlr1tm1小鼠,动物试验