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紫外吸收光谱检测

原创发布者:北检院    发布时间:2025-04-04     点击数:

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紫外吸收光谱检测是一种基于物质分子对紫外光(通常指200-400 nm波长范围)吸收特性的分析方法,广泛应用于化学、生物、医药和环境等领域。以下是其关键要点:

1. 基本原理

  • 电子跃迁:紫外光能量使分子中的电子从基态跃迁到激发态(如π→π*、n→π*跃迁)。
  • 吸收定律:遵循朗伯-比尔定律:�=�⋅�⋅�A=ε⋅c⋅l,其中:
    • �A:吸光度
    • �ε:摩尔吸光系数(L·mol⁻¹·cm⁻¹)
    • �c:溶液浓度(mol/L)
    • �l:光程(比色皿厚度,cm)

2. 仪器组成

  • 光源:氘灯(紫外区)、钨灯(可见光区)。
  • 单色器:分光,选择特定波长。
  • 样品池:石英比色皿(适用于紫外光,玻璃会吸收紫外光)。
  • 检测器:光电倍增管或CCD,将光信号转为电信号。

3. 检测步骤

  1. 样品准备:溶解样品于透明溶剂(如水、乙醇、乙腈),避免溶剂在检测波长处有吸收。
  2. 基线校正:用纯溶剂作为空白,扣除背景干扰。
  3. 扫描光谱:记录样品在紫外区的吸收曲线,确定最大吸收波长(�maxλmax​)。
  4. 定量分析:在�maxλmax​处测定吸光度,通过标准曲线计算浓度。

4. 应用领域

  • 定量分析:测定溶液中物质的浓度(如蛋白质、核酸、药物)。
  • 纯度检测:通过吸收峰形和位置判断样品纯度(如是否存在杂质吸收)。
  • 结构鉴定:辅助推断有机物结构(如共轭体系、芳香环的存在)。
  • 动力学研究:监测反应过程中吸光度变化,推算反应速率。

5. 注意事项

  • 溶剂选择:确保溶剂在检测波长范围内透明(例如:水适用于>190 nm,乙醇适用于>210 nm)。
  • 浓度控制:吸光度建议在0.2-1.0之间(避免偏离朗伯-比尔定律)。
  • 干扰排除:避免溶液中存在气泡、悬浮颗粒或强吸收杂质。
  • 仪器维护:定期校准波长准确性,清洁比色皿。

6. 常见问题

  • 基线漂移:可能由光源不稳定或温度变化引起。
  • 吸收峰过强/过弱:需调整样品浓度或稀释倍数。
  • 溶剂峰干扰:更换溶剂或选择更长检测波长。

示例应用

  • DNA浓度测定:在260 nm处测定吸光度,1 OD≈50 μg/mL(双链DNA)。
  • 药物分析:如测定阿司匹林在275 nm处的吸光度进行定量。
  • 环境监测:检测水中苯酚类污染物(紫外特征吸收约270 nm)。

如果需要更深入的操作细节或具体应用场景,可以进一步说明需求!

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测试流程

紫外吸收光谱检测流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考,因为每个样品和项目都有所不同,所以最终以工程师告知的为准。

3.关于(样品量)的需求,最好是先咨询我们的工程师确定,避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右,部分样品有所差异

5.如果对于(紫外吸收光谱检测)还有什么疑问,可以咨询我们的工程师为您一一解答。

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