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B6-Ifnar1tm1小鼠,动物试验

原创发布者：北检院发布时间：2023-02-27 点击数：

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基本信息

品系名称：B6-Ifnar1^tm1小鼠

英文名称：B6-Ifnar1^tm1

疾病名称：免疫缺陷疾病

相关基因：Ifnar1

背景品系：C57BL/6J

遗传类型：基因敲除近交系

繁殖方式：HOM X HOM

繁殖代数：6代

研究用途：IFNar1基因敲除小鼠，缺乏的I型干扰素功能，因干扰素作为抗御病毒的侵害的第一道防线，比机体的免疫反应早几小时至几天的时间发挥抗病毒作用，因此，IFN受体缺损的小鼠对病毒的感染变得特别敏感。此小鼠对于探明动物机体抵抗病毒感染具有重要的意义，该模型有可能作为研究机体抵抗病毒感染的机制的理想工具。

饲养环境：隔离或屏障设施

培育单位：北京华阜康生物科技股份有限公司

保种单位：北京华阜康生物科技股份有限公司

资源鉴定：已通过实验动物模型鉴定与评价工作委员会鉴定

鉴定日期：2020-04-29 00:00:00

特征描述

IFNar1小鼠是利用CRISPR/Cas9技术构建C57BL/6背景的IFNar1基因敲除小鼠。该小鼠缺乏的I型干扰素功能，干扰素作为抗御病毒的侵害的第一道防线，比机体的免疫反应早几小时至几天的时间发挥抗病毒作用，因此，IFN受体缺损的小鼠对病毒的感染变得特别敏感。

动物简介

IFNar1基因敲除小鼠是通过利用CRISPR/Cas9 技术，对小鼠的IFNar1基因进行靶向修饰。

营养成分

粗蛋白≥23.0%、粗脂肪≥5.0%、粗灰分≤7.0%、粗纤维≤5.0%、水份≤10%、钙1.4%～1.5%、磷1.0%～1.1%、赖氨酸≥1.32%、蛋氨酸+胱氨酸≥0.78%

生物学特性

1.生长曲线

2、解剖学特性与背景品系C57BL/6J相同。3、繁殖特性纯合子之间同胞兄妹间繁殖，繁殖能力一般，每胎产5-7只。4、自发异常

不规则脾脾脏黑色素沉积

遗传信息

1、靶基因位点选择靶基因名称：Interferon (alpha and beta) receptor 1 (IFNar1), 干扰素受体1基因ID号：15975； ENSEMBL号：ENSMUSG00000022967目标基因在ensembl网址链接：http://www.ensembl.org/Mus_musculus/Gene/Summary?g=ENSMUSG00000022967;r=16:91485238-91507441靶基因转录本：IFNar1基因有5个转录本，编码蛋白大小为590aa。基因结构如下图：

本研究以转录本IFNar1-201为对象进行基因编辑。 2、设计及构建质粒利用CRISPR/Cas9技术，针对目的基因的插入位点寻找靶序列，根据靶序列信息设计针对该位点的guide RNA，经活性检测后，将具有活性的guide-RNA和Cas9体外转录成RNA，通过显微注射将guide-RNA，Cas9 mRNA和重组DNA注射到受精卵中，从后代中筛选获得基因定点插入的阳性小鼠。根据实验目的和要求，结合IFNar1基因信息，采取如下策略：针对小鼠IFNar1基因转录本201的外显子1设计guide-RNA。该外显子序列信息为：GGCGGGGCGTCGCGGAGGGCCTAGCTGCCCAGAGGTAGTCTCCAGCTCCGCGGTGCTGCTGAGGAGAAGGAGGAGAATGTGAGCCGCCGCCCGGCCTCCCAAGACGATGCTCGCTGTCGTGGGCGCGGCGGCCCTGGTGCTGGTGGCCGGGGCGCCTTGGGTGCTACCCTCAGCTGCAG上述序列经crispr.mit.edu网站分析后，选择可结合于IFNar1分子正链且编辑效率高、脱靶率低的一条gRNA（下换线，黄色为PAM区）作为使用对象。该gRNA具体信息为GCTGGTGGCCGGGGCGCCTT。 3、显微注射及胚胎移植 gRNA经体外合成、转录后与Cas9 RNA一起注射入C57BL/6小鼠受精卵细胞，受精卵细胞移植供体ICR小鼠。