B6-Crlf2tm1小鼠,动物试验

获取试验方案？获取试验报价？获取试验周期？

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。

基本信息

品系名称：B6-Crlf2^tm1小鼠

英文名称：B6-Crlf2^tm1 mouse

疾病名称：传染性疾病、淋巴细胞白血病等

相关基因：Crlf2

背景品系：C57BL/6J

遗传类型：基因敲除

繁殖方式：HOM X HOM

繁殖代数：NA

研究用途：用于传染性疾病、炎症及过敏反应、淋巴细胞白血病的研究。

饲养环境：屏障或隔离环境

培育单位：北京华阜康生物科技股份有限公司、中国医学科学院实验动物研究所

保种单位：中国医学科学院医学实验动物研究所

资源鉴定：否

鉴定日期：暂无介绍

特征描述

CRLF2 基因的结构与功能

CRLF2 基因位于 Xp22. 3 / Ypll. 3 染色体拟常染色体区 1 ( pseudoautosomal region 1,PAR1),编码细胞因子受体样因子 2,即胸腺间质淋巴细胞受体( thymicstromal lymphopoietin receptor, TSLPR)。 CRLF2 与IL - 7 受体 a(IL - 7RA,CD127)相互作用,形成胸腺间质淋巴细胞生成因子( thymic stro - mal lymphopoietin,TSLP)的异二聚体受体,与 TSLP 信号结合,激活下游信号通路。 在 T 细胞和树突状细胞的发育、炎症反应及过敏反应中起着重要的作用,并调节 B 细胞的增殖与凋亡,从而影响 ALL 的发生与发展【1】。

CRLF2 与 ALL 发生、发展的关系

CRLF2 表达异常

2009 年,Russell 等发现前体 B 细胞白血病涉及两种染色体的异常,即 PAR1 的缺失和 PAR1 与 14 号染色体免疫蛋白重链(munoglobulin heavy chain,IGH)基因位点的异位。 P2RY 是位于CRLF2 上游的着丝粒基因,PAR1 的间隙缺损使 P2RY基因的第一个非编码区外显子与 CRLF2 的第一个外显子融合,从而形成 P2RY - CRLF2 融合基因。 PAR1与 IGH 的异位形成 IGH - CRLF2 重排。 Yoda 等研究发现,CRLF2 - F232C(苯丙氨酸 232)基因突变均可以通过相应途径使 CRLF2 高表达。

P2RY - CRLF2 融合 PARl 染色体片段的丢失,使 P2RY8 与 CRLF2 融合,形成 P2RY8 - CRLF2 融合基因,而 CRLF2 的表达受 P2RY8 启动子驱动,故可导致 CRLF2 的高表达,CRLF2 的表达量能达到正常水平的 10 倍。 Harvey 等发现 P2RY8 - CRLF2 融合基因见于 7% 的前体 B - ALL( BCP - ALL) 和超过50% 以上的唐氏综合征 ALL 中。

IGH@ / CRLF2 易位

免疫球蛋白重链位点(IGH@ )位于染色体 14q 的端粒,CRLF2 基因距端粒仅 1 Mb,因此很容易产生潜在的细胞遗传学易位,形成 IgH - CRLF2 重 排, 通 过 IgH 增 强 子 元 件, 导 致CRLF2 的高表达。 2009 年,Russell 等报道约 5%的 BCP - ALL 患者存在 IGH@ 和 CRLF2 的易位。

CRLF2 F232C 基因突变

苯丙氨酸 232(F232C)到 CRLF2 的半胱氨酸(Cys) 产生的 CRLF2 变异可提高 JAK2 下游靶基因的活性,同样导致 CRLF2 的高表达【1、2】。

信号分子通路

JAK/ STAT 途径

CRLF2 缺乏内部催化活性,需依赖酪氨酸激酶 Janus(tyrosine kinase Janus,JAK)家族的酪氨酸激酶的活性。 迄今为止发现,JAK( Janus kinase) 家族包括 JAK1、JAK2、JAK3、JAK4,STATs( signal transducer and activator of transcription ) 包 括STAT1~ 6,是 JAKs 的直接底物,能将信号传递到细胞核内,调节特定基因的表达而具体的下游靶点激活途径却尚未完全阐明。 Russell 等发现仅 CRLF2表达异常尚不足以发生白血突变。 CRLF2 与 JAK 家族中的激活性突变高度相关,有研究表明发生在假激酶或激酶结构域的 ALL 伴有JAKl / JAK2 突变,CRLF2 基因重排和 JAK2 基因突变能使 B 系前体细胞转化为细胞因子非依赖性生长的细胞。 伴有 CRLF2 易位的患者中有 50% 同时伴有 JAK1 / JAK2 激活性突变,而伴有 JAK1 / JAK2 突变的B - ALL 几乎均伴有 CRLF2 易位【1】。有报道详细描述了CRLF2与 JAK 突变导致功能 获 得及信号通路的异常。IL一7RA 突 变 导 致 JAK／STAT 与 PI3K 信号通路的活化【2】。

PI3K/ mTOR 途径

研究表明,88% 的 ALL 存在 PI3K/ AKT / mTOR 的异常活化。 PI3K/ mTOR 信号通路具体机制为:当细胞受到相关刺激后,细胞内磷脂酰肌醇 - 3 - 激酶 ( phosphatidylinositol 3 - kinase,PI3K) 活化,进而磷酸化其底物 3,4 - 二磷酸肌醇(PIP2)为 3,4,5 - 三磷酸肌醇(PIP3),并与 AkT(蛋白激酶 B)结合并使后者活化,活化的 AkT 能直接激活mTOR 复合物 1( mammal target of rapamycin complex1,mTORC1),mTORC1 磷酸化下游分子,包括翻译抑制因子 eIF - 4E 结合蛋白 1(4E binding protein,4EBP)和核糖体蛋白 S6K1,从而促进蛋白质的合成。 Tasian等通过分析 TSLP 介导的信号通路发现 TSLP 能够诱导 ALL 细胞中 JAK/ STAT 与 P13K/ mTOR 信号通路中包括 AKT、4EBP1、STAT5、S6 及 ERK 等多种蛋白的磷酸化,同时发现 JAK 抑制剂能减弱 JAK/ STAT 与P13K/ mTOR 信 号 通 路 中 上 述 相 关 蛋 白 的 磷 酸 化;PI3K/ mTOR 信号通路抑制剂,如雷帕霉素 ( rapamycin)、P1103、PP242 也能抑制 PI3K/ mTOR 信号通路的活化及下游靶蛋白的翻译。 这表明此 2 种信号通路可相互作用共同影响 B - ALL 的进程病,还需要合并其他基因【1-3】。

预后相关

CRLF2 基因异常表达与不良预后相关 多数文献报道 CRLF2高表达与不良预后相关，其复发率高于低表达患者，甚至有学者建议将 CRLF2的高表达用以指导否给予BCPALL患者干细胞移植。一些文献还对ALL不同亚组的预后进行了分析。Chen等报道高危 ALL患儿CRLF2高表达与极差的预后相关，而标危 ALL患儿无相关性。柏林法兰克福曼斯泰（BFM） 和意大利儿童肿瘤协会（AIEOP）都报道非高危组P2RY8CRLF2阳性患者有不良预后。Cario等报道，高危和中危ALL患儿， CRLF2基因缺损只存在于一部分高 CRLF2表达的患者，多因素分析提示主要是 P2RY8 CRLF2融合基因的作用，而不单纯是 CRLF2过表达，有明显的预后相关性。32属于细胞遗传学中危组 Mi等报道 CRLF2过表达并不合并其他高危细胞遗传学异常患者的 ５年OS率与中危患者近似，多因素分析显示 CRLF2不是独立预后因子，因此认为 CRLF2过表达是儿童BCP ALL的中危指标。Ensor等报道单因素分析 CRLF2表达异常与不良预后相关，而多因素分析提示其作用是由其他危险因素如细胞遗传学或 DS状态产生，因此认为 CRLF2表达异常不是儿童 ALL的一个独立危险因素，应归细胞遗传学中危组。vanderveer等观察到无 IKZF1缺失和 BCR ABL1样信号的 CRLF2高表达病例无复发，提示 CRLF2的预后价值可能由 IKZF1缺失和 （或）BCR ABL1样信号引起。另外尽管大约一半 Down患儿有 CRLF2基因缺损，且 IKZF1的改变更少，但是这些患儿与非 Down 的 ＡＬＬ患儿相比，并没有出现更差的预后【3】。

与预后不相关

部分文献报道 CRLF2过表达与高危 复 发 不 相 关。Krawczyk等报 道 19％（8/42） 的 BCP ALL患儿有 P2RY8 CRLF2融合基因，其中4例 CRLF2高表达。 CRLF2表达异常组和非 CRLF2表达异常组相比，总生存时间与无疾病进展生存时间无明显差异，这两组患者的临床和实验室特征也无明显差异，P2RY8 CRLF2融合基因与高复发率无相关性，因此也不建议给予更强的化疗。以上文献关于儿童 ＢＣＰＡＬＬ中 CRLF2预后价值的报道有差异，这种差异可能是由于以下原因引起：治疗方案不同，危险分层标准不同，患者录入标准不同等。Hunger等比较了 AIEOP BFM ALL2000和ＭＲＣＡＬＬ９７两种实验方案，P2AY8 CRLF2阳性患者的 ６年复发率没有明显不同，但 IGH@ CRLF2阳性患者有不同 （ALL97方案复发率高），因此认为P2RY8 CRLF2阳性提示患者有中危独立预后，然而 IGH@ CRLF2阳性患者预后与不同治疗方案有关【3】。

治疗相关

急性 B 淋巴细胞白血病(acute B - cell lymphoblastic leukemia,B - ALL) 是一组生物学特征与临床异质性很大的疾病。 B - ALL 按 B 细胞分化阶段分为早前B 细胞型(early Pre B - ALL)、前体 B 细胞型(B - progenitor ALL)、普通 B 细胞型( common B - ALL)、成熟B 细胞型(B - ALL)。 儿童 B 淋巴细胞白血病的治疗已经取得很大进展,据国外报道儿童 B - ALL 的长期生存率已达到 80% ~ 85%,但成人 B - ALL 的长期生存率仍不理想,仅在 35% ~ 40%。 成人 B - ALL治疗效果差主要与细胞遗传学的改变有关。 Ph 染色体是 ALL 预后不良指标,Ph 染色体阳性占儿童 B -ALL 的 3% ~ 10% ,成人的 30% 左右[2]。 Ph + ALL 的共同特点是易缓解,易复发,治疗效果差。 近年随酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的应用,Ph + ALL 预后明显改善。随着分子生物技术的发展,更多的与 B - ALL 有关的基因被发现,提出了 Ph 样 ALL( philadelphia chromosome - like acute lymphoblastic leukemia),即 Ph 阴性但预后与 Ph + 者类似。 Ph 样 ALL 常伴 ABL1、ABL2、IKZF1 突变或缺失的一组高危前体 B - ALL。 目前已知 Ph 样 ALL 累 及 的 基 因 有: ABL1、 ABL2、 CRLF2、CSF1R、EPOR、 JAK2、NTRK3、PDGFRB、PTK2B、 TSLP。Ph 样 ALL 在各个年龄阶段都可以见到。 CRLF2 基因的异常表达与 JAK 变异、BCR - ABLl 样信号、IKZF 缺失相关,其高表达与儿童 B 系急性淋巴细胞性白血病高危复发及不良预后相关【3】。

目前对于此类具有 Ph 样 B - ALL 的治疗尚无较好的方案。 JAK/ STAT 和 PI3K/ mTOR 途径信号通路抑制剂对存在 CRLF2 异常表达的 B - ALL 患者的治疗提供了新的方向。 Sarah Kathleen 等利用裸鼠动物实验证明,选择性 JAK1 / JAK2 激酶抑制剂芦可替尼(ruxolitinib)可以特异性抑制 JAK/ STAT 通路中 JAK2的表达和信号转导,在有 JAK2 异常活化和 IL7RA/LNK 突变,而无 CRLF2 异常表达的 B - ALL 治疗中具有重要意义;雷帕霉素在抑制 PI3K/ mTOR 途径的同时,也 能 一 定 程 度 上 抑 制 JAK/ STAT 通 路, 在 具 有CRLF2 表达异常的 B - ALL 治疗中有明显作用。 可见,芦可替尼和雷帕霉素在治疗 CRLF2 表达异常和JAK1 / JAK2 基因突变的 B - ALL 中具有很大的潜在治疗作用【1】。

动物简介

营养成分

生物学特性

实验仪器

测试流程

注意事项

1.具体的试验周期以工程师告知的为准。

2.文章中的图片或者标准以及具体的试验方案仅供参考，因为每个样品和项目都有所不同，所以最终以工程师告知的为准。

3.关于（样品量）的需求，最好是先咨询我们的工程师确定，避免不必要的样品损失。

4.加急试验周期一般是五个工作日左右，部分样品有所差异

5.如果对于（B6-Crlf2tm1小鼠,动物试验）还有什么疑问，可以咨询我们的工程师为您一一解答。